文献类型：会议

作　　者：刘更森 樊连梅 聂琛 李雅鹏 原永兵

作者单位：青岛农业大学生命科学学院,山东省高校植物生物技术重点实验室 青岛农业大学园艺学院,青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室

基　　金：青岛农业大学校级课题(610806);青岛农业大学新上专业建设项目(7131012)

会议文献：中国园艺学会2014年学术年会论文摘要集

会议名称：中国园艺学会2014年学术年会

会议日期：20141023

会议地点：中国江西南昌

主办单位：中国园艺学会（Sponsored by the Chinese Society for Horticultural Science）;中国农业科学院蔬菜花卉研究所（Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences）

出版单位：《园艺学报》编辑部

出版日期：20141023

学会名称：中国园艺学会

语　　种：中文

摘　　要：低温是影响葡萄生长发育和品质的主要环境因素之一,改良植物的耐寒性是解决这一问题的有效手段。常规杂交育种改良葡萄的抗寒性比较缓慢,也难以达到定向改良的目的,而利用分子生物学技术克隆抗寒相关的主效基因,则可以弥补常规育种的不足,可加速抗寒葡萄新品种的选育进程。本研究中以葡萄砧木‘贝达''''(Beta)为试验材料,克隆到冷适应蛋白COR413家族基因Vvcor1,并对其进行生物信息学分析和表达研究,为阐明该基因在葡萄低温胁迫过程中的分子作用机制奠定了研究基础,也为进一步克隆和鉴定耐寒基因提供生物信息参考。以葡萄砧木‘贝达''''自根苗为试验材料,叶面喷施0、0.1、0.25、0.5、1.0 mmol·L~(-1)水杨酸(Salicylic acid,SA),室温静置3 h,然后置于4℃恒温光照培养箱,处理72 h。采集葡萄嫩叶,液氮速冻,-80℃低温保存。利用同源性克隆方法进行基因克隆:通过NCBI的BLASTn和BLASTp进行序列相似性分析;应用服务器WoLF PSORT(http://wolfpsort.org/)进行蛋白亚细胞定位预测:利用实时荧光定量PCR分析(qRT-PCR)技术检测Vvcor1的表达情况。Vvcorl编码区全长609 bp,编码202个氨基酸,预测Vvcor1蛋白质分子量约为22.49 kD,等电点为9.55,属于碱性蛋白:不稳定参数为27.79,表明其为稳定蛋白。应用BLASTn进行核苷酸序列分析表明,该序列与毛果杨(Populus trichocarpa)、桃(Prunus persica)、蓖麻(Ricinus communis)和梅(Prunus mume)等的冷适应蛋白基因的相似性较高,在77%~82%之间;氨基酸序列与可可(Theobroma cacao)冷适应蛋白进化地位比较接近,相似性为82‰进行亚细胞定位预测表明该蛋白定位于细胞膜,且具有典型的WCOR413蛋白超家族保守结构。荧光定量PCR分析结果表明:低温胁迫诱导了葡萄Vvcor1的强势表达,通过上调该基因的表达促进葡萄砧木‘贝达''''响应低温胁迫的能力;低温胁迫条件下,叶面喷施不同浓度SA,

关 键 词：葡萄 低温胁迫 Vvcorl  克隆 表达  

分 类 号：S663.1]