文献类型：会议

作　　者：樊连梅 刘更森 王超 王永章 刘成连 原永兵

作者单位：青岛农业大学生命科学学院,山东省高校植物生物技术重点实验室 青岛农业大学园艺学院,青岛市现代农业质量与安全工程重点实验室

基　　金：青岛农业大学高层次人才科研基金项目(630929);青岛农业大学大学生科技创新基金项目;公益性行业(农业)科研专项项目(201203075-04)

会议文献：中国园艺学会2014年学术年会论文摘要集

会议名称：中国园艺学会2014年学术年会

会议日期：20141023

会议地点：中国江西南昌

主办单位：中国园艺学会（Sponsored by the Chinese Society for Horticultural Science）;中国农业科学院蔬菜花卉研究所（Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences）

出版单位：《园艺学报》编辑部

出版日期：20141023

学会名称：中国园艺学会

语　　种：中文

摘　　要：苹果果实外观红色性状主要由果皮的花青苷含量和分布决定,目前,在果实花青苷代谢和调控方面取得较大研究进展,而对苹果花青苷运输相关结构基因及其转录因子的发现和研究十分有限,对果实花青苷合成后的液泡装载和卸出机制的研究更鲜有报道。已发现一些与花青苷运输相关的液泡转运蛋白。现有研究表明,谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)促进谷胱甘肽结合杂环有机阴离子,谷胱甘肽S交联结合泵是结合ATP的ABC运输转运器,参与花青苷的运输与液泡沉积过程。本研究克隆了与苹果花青苷运输相关的MdGST基因,并对其分子特性解析和基因表达量进行了分析,为调控苹果花青苷代谢提供理论基础,对进一步阐明花青苷合成与运输的调控网络,以及利用基因工程手段进行品种果实色泽性状定向改良具有重要理论与实践意义。‘富士''''苹果果实、叶片、花瓣和枝条采于山东省莱西市河头店镇苹果园。材料采回经液氮冷冻处理后,置于-80℃超低温冰箱中保存备用。总RNA的提取和反转录合成cDNA第一链按照试剂盒的说明书进行。利用同源克隆获得MdGST的基因片段,利用其序列信息设计3''''和5''''RACE引物,通过RACE-PCR获得两端的核苷酸序列,经过序列拼接获得全长序列,然后从该序列两端设计1对引物,进行全长序列的PCR扩增,以验证RACE-PCR的正确性。以苹果延伸因子MdEF1-α(DQ341381)为内参基因,对MdGST基因的时空表达特性进行荧光定量PCR分析。通过RACE-PCR获得全长为868 bp的MdGST全长cDNA序列,编码区为642 bp,编码213个氨基酸,相对分子量为23.9937 kD,等电点为6.17;该蛋白的氨基酸序列具有硫氧还蛋白类似超家族GST N Phi和谷胱甘肽S-转移酶碳末端超家族GST C Phi的保守序列。荧光定量PCR结果表明茎、叶、花中MdGST在条红‘富士''''中的表达量高于片红‘富士'''';而在果皮和果�

关 键 词：苹果 MdGST  花青苷 运输  基因 克隆

分 类 号：S661.1]