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人巨细胞病毒DNA大片段重组cos质粒的提取鉴定及其临床应用
EXTRACTION AND IDENTIFICATION OF RECOMBINANT COSMID CONTAINING LARGE HUMAN CYTOMEGALOVIRUS DNA FRAGMENTS AND ITS CLINICAL APPLICATION
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]华西医科大学附属第二医院儿科 [2]四川大学生物工程系分子生物学实验室
基 金:国家自然科学基金青年基金
年 份:1992
卷 号:9
期 号:6
起止页码:335-338
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX1992、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:将含人巨细胞病毒(HCMV)DNA大片段的重组cos质粒转化入大肠杆菌DH5α。采用碱裂解法、煮沸法和SDS法提取纯化该大DNA重组cos质粒,并进行比较。通过限制性内切酶酶切分析,以HCMV DNA EcoRⅠ-Y片段作为探针,进行DNA印迹鉴定,并与33例19天~3月婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞DNA进行斑点杂交。结果提示:重组cos质粒转化效率为5.9×10~5转化子/μg DNA,碱裂解法可用于大质粒DNA提取,产量和纯度高,并省时。EcoRⅠ-Y片段与人白细胞DNA及其它疱疹病毒DNA无同源性,适宜予早期诊断HCMV感染,具有较血清学诊断及病毒分离培养特异性高、敏感性强和快速等优点。
关 键 词:巨细胞病毒 重组 DNA杂交 质粒
分 类 号:R394.8]
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