文献类型：期刊文章

作　　者：龙洋[1] 鲍朗[1] 吴悦涵[1] 赵明才[1] 曾献武[1] 张会东[1] 朱庆平[1]

机构地区：[1]四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室,四川成都610041

出　　处：《中国呼吸与危重监护杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助 ( 3 0 2 71172 )

年　　份：2004

卷　　号：3

期　　号：3

起止页码：181-184

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的　克隆并表达结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT 6的编码基因 ,为研究其免疫功能奠定基础。方法　以结核分枝杆菌H37Rv株基因组为模板 ,用PCR对ESAT 6基因进行扩增 ,扩增产物克隆到真核表达载体pcDNA3 1/Zeo( +)中。对重组表达载体pcDNA ESAT 6进行酶切、PCR及测序鉴定。经鉴定无误的重组质粒用DEAE 葡聚糖法转染COS 7细胞 4 8h后 ,用Trizol法提取转染细胞总RNA进行RT PCR鉴定。结果　重组质粒pcDNA ESAT 6构建成功 ,并能在COS 7细胞中有效表达。结论　结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT 6真核重组表达质粒pcDNA ESAT 6构建成功 ,为进一步研究ESAT 6和CFP 10的免疫原性。

关 键 词：结核分枝杆菌 免疫学 抗原  ESAT-6 真核表达载体 蛋白表达 鉴定  

分 类 号：R392]