文献类型：期刊文章

作　　者：姜云水[1] 方平楚[1] 付亚萍[2] 朱诚[3]

机构地区：[1]浙江大学医学院病原生物学研究所,杭州310006 [2]中国水稻研究所水稻生物学国家重点实验室,杭州310006 [3]浙江大学生命科学学院,杭州310029

出　　处：《科技通报》

基　　金：浙江省自然科学基金重点项目(ZA0213);浙江省医药卫生重点科技项目(2001ZD004)

年　　份：2004

卷　　号：20

期　　号：3

起止页码：189-193

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的　构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法　采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果　PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论　成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础.

关 键 词：生物工程  幽门螺杆菌 CAGA基因 CTB基因  水稻Wx启动子  基因融合 植物表达载体  

分 类 号：Q785]