文献类型：期刊文章

作　　者：何东苟[1] 余新炳[1] 吴忠道[1] 徐劲[1] 吴德[1] 胡旭初[1] 陈守义[1]

机构地区：[1]中山大学中山医学院病原生物学部,广州510089

出　　处：《中国人兽共患病杂志》

基　　金：广东省自然科学基金首批科研团队项目;2 11工程重点建设基金;卫生部博士点建设基金

年　　份：2004

卷　　号：20

期　　号：2

起止页码：117-121

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CSCD、CSCD2011_2012、IC、PROQUEST、WOS、核心刊

摘　　要：目的　通过cDNA文库筛选识别华支睾吸虫新基因 ,并将所发现的华支睾吸虫翻译控制肿瘤蛋白 (csTCTP)编码区克隆到原核表达质粒PGEX - 4T - 1和真核表达质粒 pcDNA3上 ,为进一步研究其功能奠定基础。 方法　将插入于 pBlue script质粒上的cDNA进行随机测序 ,在NCBI和ExPasy网站上进行序列分析 ,识别华支睾吸虫新基因 ,并应用Motifsan、Scan prosite等程序对其进行结构域分析。根据PGEX - 4T - 1和pcDNA3上的克隆位点及所发现的csTCTPcDNA编码序列设计引物 ,进行PCR扩增 ,扩增产物回收纯化后克隆到原核表达载体PGEX4T - 1和真核表达载体 pcDNA3上。构建的PGEX4T- 1-csTCTP、pcDNA3-csTCTP重组表达质粒经PCR、双酶切及测序证实。 结果　发现华支睾吸虫新基因———csTCTP ,完整阅读框含 5 10个碱基 ,编码 16 9个氨基酸 ,理论分子量为 19 4 5 96Kd。序列分析表明 ,csTCTP编码氨基酸序列与其它物种有较高的同源性 ,Motifscan及Scanprosite程序发现推导的氨基酸序列具有TCTP保守的完整功能域以及两个典型的TCTP完整标签。所构建的重组原核和真核表达质粒经PCR、双酶切及测序证实与目标基因相符。结论　发现华支睾吸虫翻译控制肿瘤蛋白基因 ,并成功构建原核和真核重组表达质粒。

关 键 词：华支睾吸虫 翻译控制肿瘤蛋白  TCTP 基因 鉴定  编码区序列克隆  

分 类 号：R383.22]