文献类型：期刊文章

作　　者：高华颖[1] 曹阳[2] 李世辉[3] 任艳[4] 李庆伟[1]

机构地区：[1]辽宁师范大学生命科学学院,大连116029 [2]大连理工大学生物化工学院生物工程系,大连116012 [3]大连森林动物园,大连116001 [4]大连复星实业生物科技有限公司,大连116000

出　　处：《遗传》

基　　金：辽宁省优秀青年科研人才培养资助计划项目(编号:973014);大连市科委复合型人才基金资助项目(99-2)

年　　份：2003

卷　　号：25

期　　号：3

起止页码：283-290

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：采用直接注射的方法,将脂质体包裹的含人乳铁蛋白基因的重组质粒pLNCXHLF注入兔睾丸组织和羊输精管中,一个月后分别与正常雌兔及正常的母羊交配。所产仔兔均为活体,经PCR和Southern检测,转基因仔兔阳性率平均为35%(11/31);羔羊经引物F1/R1系统PCR检测阳性率为33.3%(4/12),F2/R2系统PCR检测阳性率为25%(3/12)。将流产羔羊组织解剖后提取舌、肺、肝脏、肌肉、皮肤、脑、生殖腺、脾脏、小肠、心脏、肾脏共11种组织的总DNA进行PCR检测,发现:F1/R1和F2/R2系统PCR检测出阳性信号存在于不同组织;F2/R2PCR系统检测阳性信号较F1/R1PCR系统少;而且各种组织的外源DNA存在的拷贝数不等,造成阳性信号的强弱程度不同。结果表明:1)脂质体包裹外源基因转染精子的方法,可将外源基因导入受精卵,并得到了较高的转基因阳性率;2)精子携带外源DNA的整合过程是随机的,在受精过程和胚胎早期分化过程中可能发生了片段丢失、不完全整合或游离于基因组存在而产生嵌合体。本文的研究结果证明了该方法是一种简捷有效的新途径,为进一步深入探讨精子介导转基因动物制备可行性奠定了基础,给精子载体法制备转基因哺乳动物研究提供了有价值的参考。

关 键 词：精子 转基因动物 脂质体  人乳铁蛋白基因 重组质粒  兔睾丸组织  外源基因 嵌合体

分 类 号：Q789]