文献类型：期刊文章

作　　者：陈浩[1] 翁秀芳[1] 吴雄文[1] 梁智辉[1] 韩军艳[1] 黄亚非[1] 龚非力[1]

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系,武汉430030

出　　处：《华中科技大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30271201);科技部973计划资助项目(No.2001CB510008)

年　　份：2004

卷　　号：33

期　　号：1

起止页码：1-4

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 克隆和表达HLA I类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA I类分子提供基础。方法 利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E.coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定。结果 酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA I类分子重链形成具有天然构象的HLA I类分子。结论 人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA I类分子的功能。

关 键 词：β2m基因  克隆 表达  人工制备  

分 类 号：R392-33]