文献类型：期刊文章

作　　者：曾智锐[1,2] 雷珊[1,2] 张金娟[3] 杨宇石[4] 薛燕[1,2] 兰金芝[5] 孙远梅[1,2] 胡晓霞[1,2] 陈腾祥[1,5]

ZENG Zhirui;LEI Shan;ZHANG Jinjuan;YANG Yushi;XUE Yan;LAN Jinzhi;SUN Yuanmei;HU Xiaoxia;CHEN Tengxiang(Department of Physiology,School of BasicMedical Science,Guizhou Medical University,Guiyang550004,Guizhou Province,China;Guizhou Provincial Key Laboratory ofPathogenesis&Drug Research on CommonChronic Diseases,Guizhou Medical University,Guiyang550004,Guizhou Province,China;Laboratory of Functional Experiments,GuizhouMedical University,Guiyang550004,GuizhouProvince,China;Department of Pathology,School of Clinical Medicine,Guizhou MedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou Province,China;Guizhou Provincial Key Laboratory ofRegenerate Medical Research,Guizhou Medical University,Guiyang550004,Guizhou Province,China)

机构地区：[1]贵州医科大学基础医学院生理学教研室,贵州贵阳550004 [2]贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室,贵州贵阳550004 [3]贵州医科大学基础医学院机能实验室,贵州贵阳550004 [4]贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵州贵阳550004 [5]贵州医科大学贵州省再生医学重点实验室,贵州贵阳550004

出　　处：《肿瘤》

基　　金：贵州省应用基础研究计划重大专项(编号：黔科合J重大字[2015]2003)~~

年　　份：2019

卷　　号：39

期　　号：8

起止页码：595-605

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2019_2020、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和Calpain 2 mRNA在胰腺癌组织中的表达情况,以及它们与患者生存预后的相关性。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测在常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下,胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1、Calpain 2 mRNA和蛋白的表达水平。将靶向Calpain 2编码基因CAPN 2的siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CAPN 2基因沉默效果。分别在常氧和缺氧条件下培养Calpain 2低表达组和阴性对照组细胞,然后采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力,再采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Calpain 2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,最后用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。结果:相对于正常胰腺组织,胰腺癌组织中Calpain 1和Calpain 2 mRNA表达水平明显增高(P值均<0.01),并且Calpain 2高表达与胰腺癌患者的不良预后有明显相关性(P=0.013)。相对于常氧条件,缺氧条件下胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1 mRNA和蛋白表达水平变化不明显,而Calpain 2 mRNA和蛋白表达水平明显上调(P值均<0.01)。成功构建Calpain 2低表达的PANC-1细胞株。在常氧条件下,下调Calpain 2表达可明显抑制PANC-1细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.05);缺氧培养可促进PANC-1细胞迁移和侵袭(P值均<0.05);而在缺氧条件下,下调Calpain 2表达可以逆转缺氧培养对PANC-1细胞迁移和侵袭的促进作用(P值均<0.05)。常氧条件下,下调Calpain 2表达的胰腺癌PANC-1细胞中,E-cadherin表达量增多(P <0.05),Vimentin表达量减少(P <0.05),而且PANC-1细胞轮廓变大,部分细胞有凋亡样改变;缺氧条件下,E-cadherin蛋白表

关 键 词：胰腺肿瘤  细胞低氧 肿瘤微环境  卡配因2  上皮-间质转化 肿瘤侵润

分 类 号：R735.9]