文献类型：期刊文章

作　　者：王兵[1] 刘晴晴[1] 夏春林[1] 刘朝晖[1]

机构地区：[1]苏州大学医学部人体解剖与组织胚胎学系,江苏苏州215123

出　　处：《江苏大学学报（医学版）》

年　　份：2015

卷　　号：25

期　　号：3

起止页码：212-216

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:通过病毒载体转染体外培养的海马神经元,观察后者表达分泌性的β折叠阻断肽(β-sheet breaker peptide,BSB)的生物活性。方法:采用分子克隆技术构建编码神经营养素4(neurotrophin-4,NT4)信号肽-BSB融合基因的重组腺伴随病毒(recombinant adeno-associated vrius,r AAV)载体,AAV在包装细胞系293细胞中进行包装,蔗糖梯度离心法纯化病毒颗粒,斑点杂交法测定重组病毒滴度。MTT检测及电镜观察BSB的生物学效应。结果:成功构建p SSHG/NT4-BSB质粒载体,纯化后获得滴度为3.6×1012~1.8×1013/m L的病毒颗粒。通过病毒感染培养的神经元分泌表达的BSB有效地抑制了β-淀粉样蛋白(Aβ)的纤维化聚集,明显降低了Aβ在体外的神经元毒性。结论:采用AAV载体介导的BSB短肽的分泌表达在体外培养的海马神经元中显示了良好的生物活性。

关 键 词：阿尔茨海默病  β折叠阻断肽  信号肽 腺伴随病毒

分 类 号：R346[基础医学类] R749.16