文献类型：期刊文章

作　　者：罗志勇[1] 陆秋恒[1] 刘水平[1] 陈湘晖[1] 罗建清[1] 汤立军[1] 胡维新[1]

机构地区：[1]中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心,长沙410078

出　　处：《生物化学与生物物理学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (No .3 980 0 190 );湖南省自然科学基金资助项目 (No .0 2JJY2 0 45 );湖南医科大学杰出青年科学基金资助项目 (No.2 0 0 0 0 2 )~~

年　　份：2003

卷　　号：35

期　　号：6

起止页码：554-560

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RSC、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000183733400011)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：人参植物根进行的特定发育过程在药用次生物———人参皂苷生物合成和累积中发挥重要作用。为从人参根中分离出人参皂苷生物合成相关基因 ,采用抑制差减杂交技术 ,构建四年和一年生人参根组织mRNA群体间正向差减cDNA文库。对从差减文库中筛选的 4 0个阳性cDNA克隆进行酶切、PCR与逆向Northern斑点杂交鉴定、DNA测序以及核苷酸序列同源性比较。结果表明 ,获得的 6个差减克隆在GenBank/DDBJ/BMBL无对应的同源基因 ,代表新基因序列。与此同时 ,使用Northern印迹杂交验证及半定量RT PCR进一步确认 ,6个转录本为根发育阶段差异性表达基因。因而提示 ,它们可能在人参皂苷生物合成中发挥了重要作用。此外 ,在人参茎、叶与种子中亦能检测到上述基因转录本的表达。目前 ,6个新基因已被命名 ,在GenBank注册并获登录号 ,为克隆上述新基因cDNA全长序列及深入鉴定其在人参皂苷生物合成中的功能提供了重要实验依据。

关 键 词：人参植物  人参皂苷生物合成  基因筛选 抑制差减杂交 五加科

分 类 号：Q943[植物生产类]