文献类型：期刊文章

作　　者：王露[1] 范慧[2] 莫晓宁[2] 张颖妹[1] 魏征人[1] 钟英成[1] 黄大无[1]

机构地区：[1]北京大学人类疾病基因研究中心,北京100083 [2]北京北医联合生物工程公司

出　　处：《北京大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金 ( 3 0 2 0 0 15 7)资助~~

年　　份：2003

卷　　号：35

期　　号：4

起止页码：360-363

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :建立简便、有效的原核表达促凋亡相关蛋白PDCD5的纯化路线 ,获得高纯度的PDCD5蛋白 ,并观察其稳定性。方法 :以包涵体形式表达的PDCD5融合蛋白 ,经包涵体洗涤、变性、复性、酶切、DEAESepharoseFastFlow和SephacrylS 2 0 0两步层析分离获得PDCD5蛋白。选用毛细管电泳方法检定蛋白质纯度 ,SDS -PAGE检定蛋白质的稳定性。结果 :经毛细管电泳方法检测PDCD5蛋白纯度为 10 0 % ,相对分子质量 15 80 0 ,等电点 5 .9。生物学活性分析PDCD5蛋白能够促进撤除细胞因子的HL 6 0细胞的凋亡 ,呈现一定的量效关系。稳定性研究发现储藏中的PDCD5蛋白不稳定 ,对温度敏感 ,4℃和 2 5℃极易降解 ,而 - 2 0℃和冻干保存则相对稳定。结论 :本研究建立的蛋白纯化方法可以获得大量、高纯度PDCD5蛋白。稳定性实验提示PDCD5宜在 - 2 0℃以下或冻干保存。

关 键 词：重组凋亡相关蛋白  PDCD5 纯化 稳定性 HL-60细胞

分 类 号：R392.12]