期刊文章详细信息
2,4-二氯苯酚羟化酶在大肠杆菌中的表达及靛蓝的生物合成
Cloning and Expression of 2,4-Dichlorophenol Hydroxylase and Indigo Biosynthesis in Escherichia Coli
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]福建省武夷山市防疫站检验科,福建武夷山354300 [2]南京市第二十九中学,江苏南京210036 [3]东南大学医学院生物工程学系,江苏南京210009
年 份:2015
卷 号:22
期 号:6
起止页码:476-479
语 种:中文
收录情况:CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊
摘 要:靛蓝是目前使用量最大的染料,也是具有多种药效的天然药物中的成分,生物合成法生产靛蓝具有广阔的前景。该文首次发现tfd B基因编码的2,4-二氯苯酚羟化酶具有转化色氨酸合成靛蓝的能力,为进一步研究其转化机理、优化转化工艺,作者构建了携带tfd B基因的工程菌E.coli BL21(28a-tfd B),对工程菌进行了培养和诱导表达,并进一步研究了工程菌对色氨酸的转化作用。SDS-PAGE和酶活分析结果表明,tfd B基因已成功表达(55k),表达产物可将色氨酸转化为靛蓝。对培养基、诱导条件、诱导时间等转化条件的初步研究表明,采用色氨酸培养基(0.2 g/L色氨酸,2 g/L蛋白胨,5 g/L酵母粉,10 g/L Na Cl),IPTG诱导浓度0.2 mmol/L,诱导16 h,靛蓝浓度可达39.16 mg/L,这为重组E.coli BL21(p ET28a/tfd B)应用于靛蓝工业化生产的后续研究奠定了基础。
关 键 词:2,4-二氯苯酚羟化酶 表达 色氨酸 靛蓝 生物合成
分 类 号:TQ613.3] Q936]
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