文献类型：期刊文章

作　　者：王泽根[1] 解伟[1] 许卓斌[1] 涂孝洁[1] 金海珍[1] 厉道娟[1] 吴旻[1] 张娟[1] 王旻[1]

机构地区：[1]中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室,江苏南京210009

出　　处：《药物生物技术》

基　　金：中国药科大学中央高校基本科研专项基金资助项目(No.JKY2011025);国家自然科学基金资助项目(No.81273425)

年　　份：2015

卷　　号：22

期　　号：1

起止页码：1-4

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：PCR法扩增rh Dll4基因片段,用EcoR I和Not I双酶切后克隆到真核载体p CA中,并对其进行双酶切和测序鉴定;用电转法将真核载体导入CHO细胞中,并利用Western blot法检测rh Dll4在CHO细胞中的表达水平。经双酶切和测序验证,成功构建p CA-rh Dll4真核表达载体。Western bolt验证表明,rh Dll4基因在CHO细胞中正常表达。经镍柱亲和层析纯化后,rh Dll4蛋白纯度达95%以上。MTT法检测,rh Dll4可以有效地抑制HUVEC增殖;同时可以促进Notch1受体的切割,表明所表达的rh Dll4蛋白具有生物学功能,为本实验下一步抗rh Dll4单克隆抗体的筛选奠定了基础。

关 键 词：重组人Dll4  构建  真核表达

分 类 号：Q78]