文献类型：期刊文章

作　　者：张桂敏[1] 张晚鸣[1] 何国帮[1] 马立新[1]

机构地区：[1]湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室,武汉430062

出　　处：《华中农业大学学报》

基　　金：武汉市青年科技晨光计划(20025001038);湖北省自然科学基金项目(2003ABA118)资助

年　　份：2003

卷　　号：22

期　　号：6

起止页码：529-532

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据文献报道的烟曲霉植酸酶序列,设计引物以烟曲霉CCTCCAF93044的总DNA为模板进行梯度PCR,扩增出了1条约1.4 kb的带,将该片段进行DNA序列测定,其序列与已报道的烟曲霉植酸酶序列完全一致,但只编码完整的成熟植酸酶序列。将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达质粒pHBM108。该质粒转化毕赤酵母KM71所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,其中一重组子经144 h诱导,植酸酶表达量至少为1.25 mg/ml,比同类报道的表达量高出60％以上,以植酸钠为底物测得酶活为11.17U/ml。

关 键 词：烟曲霉植酸酶基因  基因克隆 毕赤酵母 基因表达  菌种 质粒 PCR扩增 饲料添加剂

分 类 号：S816.7]