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Bacillus sphaericus 2297蛋白酶基因sph在毕赤酵母中的表达及重组酶酶学性质
Expression of Protease Gene sph of Bacillus sphaericus 2297 in Pichia pastoris and Characterization of the Recombinant Enzyme
文献类型:期刊文章
GU Zhang-hui;LAI Jiang-li;WANG Shu-jun;JIAO Yu-liang;LIU Shu;FANG Yao-wei(College of Marine Science and Technology,Huaihai Institute of Technology,Lianyungang 222005,China;Jiangsu Marine Resources Development Research Institute,Lianyungang 222005,China;College of Marine Resources and Environment,Huaihai Institute of Technology,Lianyungang 222005,China)
机构地区:[1]淮海工学院海洋生命与水产学院,江苏连云港222005 [2]江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港222005 [3]淮海工学院海洋资源与环境学院,江苏连云港222005
基 金:国家自然科学基金项目(31772016);江苏省自然科学基金面上项目(BK20151282);江苏省"六大人才高峰"第十二批高层次人才项目(SWYY-195);第48批"留学归国人员"科研启动基金;淮海工学院研究生培养创新工程项目(XKYCXX2017-19);淮海工学院研究生培养创新工程项目(XKYCXX2017-20)
年 份:2019
卷 号:40
期 号:7
起止页码:114-118
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAS、CSA-PROQEUST、FSTA、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:将Bacillus sphaericus 2297蛋白酶基因sph进行毕赤酵母密码子优化后,进行全基因合成,并构建了重组酵母菌P.pastoris X33-ppicZalphA-sph,对重组酶进行酶学性质研究。结果表明,重组酶的最适反应温度和最适反应pH为40℃和8.0,且其为20~30℃中保温10 h仍有80%以上的酶活力、在pH7.0~9.0条件下孵育24 h,仍能保持60%以上的酶活性。K^+、Sr^(2+)对酶活有明显激活作用,而Fe^(3+)、Ba^(2+)对酶活有明显抑制作用;重组蛋白酶SPH在极性常数为0.8~3.1的25%的正丁醇、环己烷、二甲苯中孵育6 d后,仍能保留50%以上的酶活性。本研究为B.phaericus 2297和B.phaericus DS11蛋白酶有机溶剂耐受性机制的研究奠定基础。
关 键 词:耐有机溶剂蛋白酶 毕赤酵母 酶学性质 有机溶剂稳定性
分 类 号:Q78] Q55
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