文献类型：期刊文章

作　　者：段志良[1,2] 周湧超[2] 杨澜[2] 陈新宇[1] 文金生[2] 金胜威[1,3]

DUAN Zhi-liang;ZHOU Yong-chao;YANG Lan;CHEN Xin-yu;WEN Jin-sheng;JIN Sheng-wei(Department of Clinical Laboratory,the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou 325027,China;Institute of Arbovirus,School of Basic Medical Sciences,WenzhouMedical University,Wenzhou325000,China;Department of Anesthesia and Critical Care,the SecondAffiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou325027,China)

机构地区：[1]温州医科大学附属第二医院检验科,温州325027 [2]温州医科大学基础医学院虫媒病毒研究所,温州325000 [3]温州医科大学附属第二医院麻醉与重症医学科,温州325027

出　　处：《现代免疫学》

基　　金：浙江省自然科学基金(LY17C010004);国家自然科学基金(81501363;31870159);温州市科技计划项目(Y20150093)

年　　份：2019

卷　　号：39

期　　号：2

起止页码：120-125

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本研究旨在制备抗登革病毒(dengue virus,DENV)血清型2 (DENV2)E蛋白Ⅲ区(envelope protein domainⅢ,EDⅢ)单克隆抗体(简称单抗)并研究其诊断特异性。合成编码DENV2-EDⅢ的基因并将其克隆入原核表达质粒pET21a;将重组质粒转入大肠埃希菌菌株BL21;用重组表达的EDⅢ免疫小鼠;将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0融合;将可产生识别抗EDⅢ单抗的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔;采用蛋白G亲和层析法从腹水中纯化单抗;采用间接ELISA和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)评估所制备的单抗识别DENV血清型1～4 (DENV1～4)的能力。本研究成功表达了DENV2-EDⅢ,并制备出3株杂交瘤细胞,杂交瘤细胞所分泌的小鼠源性单抗既可识别DENV2,又可交叉识别DENV1、DENV3和DENV4。

关 键 词：登革病毒 E蛋白Ⅲ区  单克隆抗体

分 类 号：R392]