文献类型：期刊文章

作　　者：张立民[1] 傅玉才[1] 由弘[2] 王进成[2]

机构地区：[1]汕头大学医学院寄生虫学教研室,广东汕头515031 [2]新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000

出　　处：《寄生虫与医学昆虫学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ;编号 30 1 70 71 0

年　　份：2003

卷　　号：10

期　　号：3

起止页码：134-138

语　　种：中文

收录情况：BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：目的 :构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒 ,表达及纯化EgA31 GST融合蛋白 ,为疫苗的研究奠定基础。方法 :PCR扩增EgA31cDNA ,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切 ,然后亚克隆入pGEX 5X 3质粒 ,转化BL2 1宿主菌 ,IPTG诱导重组质粒的表达 ,亲和层析纯化表达产物 ,Bradford法测定重组蛋白含量 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析鉴定。结果 :SDS PAGE显示分离纯化的EgA31 GST融合蛋白为 4 5kDa ,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确。EgA31 GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在 6 6kDa处特异性反应。结论 :EgA31 GST融合蛋白获得高效表达 ,并成功纯化 ,初步实验证明具有良好的免疫原性 。

关 键 词：细粒棘球绦虫 疫苗  融合蛋白 原核表达 纯化  包虫病

分 类 号：R392]