文献类型：期刊文章

作　　者：敖敬群[1] 王瑾雯[1] 陈新华[2] 王珣章[1] 龙綮新[1] 娄高明[3]

机构地区：[1]中山大学生物防治国家重点实验室,广州510275 [2]国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室,厦门361005 [3]广东省兽医生物技术重点实验室,广州510640

出　　处：《生物化学与生物物理进展》

基　　金：国家"九五"科技攻关项目 (96 C0 1 0 4 0 3 );国家自然科学基金资助项目 (3 960 0 10 9)~~

年　　份：2003

卷　　号：30

期　　号：4

起止页码：629-633

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、SCI(收录号：WOS:000184947500024)、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000184947500024)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白 .将伪狂犬病病毒闽A株 gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαA中 ,获得的重组表达载体pPICZαA FL电击转化野生型酵母菌SMD116 8后 ,得到多株酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL .经高浓度ZeocinTM筛选、表型鉴定、工程菌的诱导表达及表达产物的鉴定 ,最后得到高效表达 gE基因去信号肽片段的酵母工程菌SMD116 8/ pPICZαA FL 7.工程菌 72h培养上清的SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳与蛋白质印迹结果显示 ,gE基因去信号肽片段表达产物大小约为 80ku ,比预期的 6 3 8ku大 .凝胶薄层扫描结合Bradford蛋白质总含量测定结果表明 ,表达产物占工程菌培养上清总蛋白的 13 4 9% ,表达量可达 11 7mg/L .间接ELISA结果表明重组表达产物具有良好的抗原性 。

关 键 词：伪狂犬病病毒 闽A株  GE基因 信号肽 表达  

分 类 号：Q939.4] Q786