文献类型：期刊文章

作　　者：李雪雁[1] 王艇[2] 苏应娟[2]

机构地区：[1]电子科技大学中山学院生物技术系,中山528402 [2]中山大学生命科学院,广州510275

出　　处：《生态科学》

基　　金：国家自然科学基金(30170101;30170789);广东省自然科学基金(011125)

年　　份：2003

卷　　号：22

期　　号：2

起止页码：120-123

语　　种：中文

收录情况：CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：为得到桫椤RAPD扩增的最佳条件,对影响桫椤RAPD扩增的模板纯化方法、模板含量、酶浓度、Mg^(2+)浓度、dNTP浓度和引物浓度及扩增程序等多种因素进行了探讨。结果表明,用玻璃奶和蛋白酶K纯化后获得的DNA作为模板进行RAPD反应,其扩增带比用未纯化的和仅用无水乙醇再沉淀的DNA为模板更亮,更清晰,重复性更好;模板浓度、酶浓度、Mg^(2+)及dNIT浓度、引物浓度及退火温度这些因素都会对RAPD产生影响。经过本实验的探索,发现桫椤RAPD扩增的最佳体系是(2.5×10^(-2)mL反应体积):模板浓度为70ng,Mg^(2+)浓度为2.5mmol·L^(-1),dNTP为0.2mmol·L^(-1),引物3×10^(-4)mL;最佳扩增程序为:94℃200s,一个循环;94℃60s,36℃60s,72℃120s,40个循环:72℃600s,一个循环:4℃保存。

关 键 词：孓遗植物  桫椤 RAPD分析 反应参数  

分 类 号：Q949.36[植物生产类] Q943