文献类型：期刊文章

作　　者：金晶[1] 彭颖[1] 吕建新[1]

机构地区：[1]温州医学院检验医学与公共卫生学院细胞与分子医学研究所,温州325027

出　　处：《中国免疫学杂志》

基　　金：浙江省医药卫生重点科技项目 (No .2 0 0 1ZD0 0 7) ;温州市科技发展计划项目 (No .S2 0 0 1A2 1)

年　　份：2003

卷　　号：19

期　　号：7

起止页码：499-501

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微孔板酶联夹心杂交技术 ,定量检测人IL 18mRNA。方法 :针对人IL 18mRNART PCR产物一条链的不同区域序列设计一对特异探针 ,其中一条为捕获探针 ,5’端为氨基修饰 ,可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合 ,“竖直”地包被在微孔板内 ;另一条为检测探针 ,3’端标记生物素。提取人外周血单个核细胞中总RNA ,进行RT PCR扩增IL 18mRNA ,产物热变性后加入已包被捕获探针的微孔板内进行杂交 ,再加入检测探针与已杂交的产物结合 ,最后经亲和素 辣根过氧化物酶 (SAV HRP)系统检测杂交信号。结果 :该法检测IL 18mRNART PCR产物的灵敏度明显高于琼脂糖凝胶电泳 ,重复性良好 ,且结果数据化。结论 :该方法具有操作简单、灵敏度高、特异性强等优点 ,适合于PCR扩增产物的定量检测。

关 键 词：微板酶联夹心杂交法  定量检测  IL-18mRNA  RT-PCR

分 类 号：R392.11] R446.61[基础医学类]