文献类型：期刊文章

作　　者：朱晨笛[1] 郭慕真[1] 李颖颖[1] 武坷鑫[1] 黄敏[1]

ZHU Chen-di;GUO Mu-zhen;LI Ying-ying;WU Ke-xin;HUANG Min(Department of Occupational Health and Environmental Health,School of Public Health,Ningxia Medical University,Yinchuan,Ningxia 750004,China)

机构地区：[1]宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系,宁夏银川750004

出　　处：《环境与职业医学》

基　　金：国家自然科学基金项目(81360435);宁夏高等学校一流学科建设(公共卫生与预防医学学科)资助项目(NXYLXK2017B08)

年　　份：2019

卷　　号：36

期　　号：1

起止页码：17-25

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2019_2020、IC、JST、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：[目的]探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)/转录因子激活蛋白-1(AP-1)信号通路在百草枯致大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞间发生上皮-间充质转变(EMT)中的作用。[方法]体外培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN,终浓度0、25、50、100、200、300、400μmol/L百草枯处理细胞24 h,终浓度200μmol/L百草枯分别处理细胞0、12、24、36、48、60、72 h,倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞相对存活率,确定剂量和时间-效应关系;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;免疫荧光、免疫印迹法(Western blot)分别检测上皮标志蛋白E-cad、ZO-1和间质标志蛋白FSP-1、α-SMA表达水平;Western blot检测JNK/p-JNK、c-jun/p-c-jun、c-fos/p-c-fos蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测AP-1的转录活性,评估百草枯对JNK信号通路的激活作用。[结果] 200μmol/L百草枯诱导细胞由卵圆形或多边形的上皮细胞变成长梭形的间质细胞,细胞间连接消失,且时间越长形态学改变越明显。与对照组相比,100、200、300、400μmol/L百草枯染毒组的细胞存活率明显降低(P <0.05),200μmol/L百草枯诱导细胞不同时间(24、36、48、60、72 h)的细胞存活率明显降低(P <0.05)。200μmol/L百草枯诱导细胞不同时间(12、24、36 h):细胞凋亡率随诱导时间的延长而增加,尤其36 h诱导组的细胞凋亡率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P <0.05);细胞迁移指数、侵袭细胞数均明显升高(P <0.05);上皮细胞标记蛋白E-cad、ZO-1表达下调,且下调的趋势随时间延长更加明显(P <0.05);间质细胞标记蛋白FSP-1、α-SMA表达随时间的延长逐渐升高(P <0.05);与对照组相比,100、200、300μmol/L百草枯染毒可诱导p-JNK、p-c-jun、p-c-fos蛋白表达明显上调;200、300μmol/L百草枯染毒组较对照组比较,AP-1转录活性明显升高,差异

关 键 词：百草枯 Ⅱ型肺泡上皮细胞  上皮-间充质转变  JNK信号通路 AP-1

分 类 号：R99]