文献类型：期刊文章

作　　者：熊爱生[1] 等[1] 范惠琴[1] 张嗣良[1] 彭日荷[2] 姚泉洪[2] 郭美锦[3]

熊爱生[1];等[1];范惠琴[1];张嗣良[1];彭日荷[2];姚泉洪[2];郭美锦[3];

机构地区：[1] [2]上海市农业科学院生物技术研究所 [3]华东理工大学

出　　处：《生物化学与生物物理学报：英文版》

年　　份：2003

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：154-160

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD（2011-2012）、JST、PUBMED、RSC、SCIE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：乙醇氧化酶启动子被分离、克隆，并建立了转化方法后，毕赤酵母已被发展成为一种高效的外源蛋白表达宿主。为了进一步提高外源蛋白质的分泌表达，对信号肽序列进行了研究。首先按毕赤酵母的偏爱密码合成了酿酒酵母的α因子信号肽序列MF4I，随后在MF4I信号肽序列的N端分别引入1-10个毕赤酵母Aox1蛋白质的N端氨基酸，构成10种不同的分泌信号肽序列，10种不同的分泌信号肽序列被用于植酸酶基因的毕赤酵母分泌表达。以上新的信号肽序列都可使植酸酶的分泌表达量增加，而以N端增加A、I、P三个氨基酸的信号肽序列引起的提高最大；和野生型的酿酒酵母α因子信号肽序列相比，使植酸酶分泌表达量增加5倍，摇瓶中植酸酶的分泌表达量为90mg/L。此外在MF41信号肽的引导序列的内切蛋白酶间增加了E E A E A E A E A P和K共10个氨基酸，进一步提高信号肽的分泌效率，使表达又提高约35％，使得摇瓶中酸性植酸酶的表达量达到120mg/L，是pPCI9K表达量的8倍。

关 键 词：信号肽序列 毕赤酵母 表达  外源蛋白质  影响  表达载体  高效表达  

分 类 号：Q786]