文献类型：期刊文章

作　　者：沈毅珺[1] 潘卫[1] 易进华[2] 徐容[3] 陈秋莉[1] 潘欣[1] 冯春芝[1] 邓松华[3] 戚中田[1] 刘彦君[2]

机构地区：[1]第二军医大学基础医学部微生物学教研室,上海200433 [2]上海复旦张江生物医药股份有限公司 [3]安徽医科大学病理生理学教研室

出　　处：《第二军医大学学报》

基　　金：国家"8 6 3"计划项目 (2 0 0 1AA2 15 0 5 1;2 0 0 2AA2Z330 9)

年　　份：2003

卷　　号：24

期　　号：3

起止页码：298-302

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体 pCANTAB5X中 ,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量 (>30 0个氨基酸 )功能蛋白的新型噬菌粒展示载体。 方法 :应用 5′端含XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ识别序列的引物 ,PCR扩增获得XbaⅠ StuⅠ SalⅠ KpnⅠ [G4S]3 NotⅠ衔接片段 ,将该PCR产物克隆到pMD 18T中 ,再将该片段插入 pCANTAB 5X中构建成新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L。 结果 :限制性内切酶酶谱及DNA序列分析证明[G4S]3多肽接头和限制性内酶切位点XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ序列被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB 5L中。 结论 :成功构建了新型噬菌粒展示载体 pCANTAB5L ,并能有效展示功能靶蛋白。

关 键 词：噬菌体展示 噬菌粒载体  多克隆位点 多肽接头  

分 类 号：Q782]