文献类型：期刊文章

作　　者：周磊[1] 张馥敏[1] 杨志建[1] 马文珠[1] 陆丽[2] 丁兆丰[2] 丁必森[2] 高翔[2] 哈团柱[3] 李传富[3]

机构地区：[1]南京医科大学第一附属医院心脏内科,江苏省南京市210029 [2]南京大学分子医学研究所,江苏省南京市210029 [3]美国东田纳西州大学JamesH.Quillen医学院外科系

出　　处：《中国临床康复》

基　　金：hVEGF165/Angiopoietin-1基因转移促血管生成作用的研究(BK2001118)

年　　份：2003

卷　　号：7

期　　号：3

起止页码：434-436

语　　种：中文

收录情况：CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、SCOPUS、普通刊

摘　　要：目的:克隆人血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor165,VEGF165)和血管生成素-1(angiopoietin-1)的全长编码基因,构建表达该基因的复制缺陷型腺病毒载体Ad-Ang1和Ad-VEGF165。方法:通过RT-PCR方法克隆人VEGF165和Ang1全长编码基因。Ad-VEGF165和Ad-Ang1通过同源重组方法构建。将Ad-VEGF165和/或Ad-Ang1转染大鼠胚胎心脏成肌细胞(H9C2)24h后,Westernblot方法分析VEGF165和Ang1蛋白表达量;核酸电泳分析细胞基因组降解检测凋亡水平。结果:测序显示VEGF165序列与基因库序列相同;Ang1序列与基因库序列存在一个碱基的差异,但编码氨基酸无改变。VEGF165和Ang1蛋白表达分别为对照组的11.65倍和3.53倍。Ad-VEGF165和/或Ad-Ang1转染后的H9C2细胞对过氧化氢诱导的细胞凋亡具有明显的抵抗能力。结论:所构建的Ad-Ang1和Ad-VEGF165能有效转染心脏成肌细胞,表达出功能性目的蛋白,具有抗细胞凋亡作用。

关 键 词：血管生成因子 内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子  腺病毒科 重组  遗传  缺血性心脏病 治疗  

分 类 号：R541]