文献类型：期刊文章

作　　者：宋伟杰[1] 张璠[1] 王兆松[1] 田建飞[1] 牛瑞芳[2]

Song Weijie;Zhang Fan;Wang Zhaosong;Tian Jianfei;Niu Ruifang(Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,National Clinical Research Center for Cancer,Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Laboratory Animal Center,Tianjin 300060,China;Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,National Clinical Research Center for Cancer,Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Public Laboratory,Tianjin 300060,China)

机构地区：[1]国家恶心肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室、天津医科大学肿瘤医院实验动物中心,天津300060 [2]国家恶心肿瘤临床医学研究中心、天津市肿瘤防治重点实验室、天津医科大学肿瘤医院公共实验室,天津300060

出　　处：《中华肿瘤杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81372844)。

年　　份：2025

卷　　号：47

期　　号：3

起止页码：254-261

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、核心刊

摘　　要：目的建立膜联蛋白A2(ANXA2)基因敲除小鼠模型,为后续ANXA2相关机制研究提供有效工具。方法采用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除小鼠模型,获得的模型经过组织DNA提取后进行PCR测序和Western blot检测,鉴定ANXA2基因型和蛋白的表达。成功构建的模型分为ANXA2敲除组与野生型组(WT组),通过小鼠尾静脉注射小鼠肺癌细胞(LLC)制作转移模型,使用活体成像技术对转移灶形成进行监测,并最终统计两组小鼠的生存率。结果设计针对ANXA2第1外显子的小向导RNA序列,利用显微注射技术获得16只首建鼠小鼠。通过同种小鼠杂交技术,最终获得30只纯合后代。品系建成后,小鼠分为ANXA2敲除组与WT组,每组各8只小鼠,分别建立LLC肺转移模型。WT组与ANXA2敲除组相比,转移灶数量显著增多(分别为7和1个),荧光强度强于敲除组(P=0.002)。GEPIA2数据库搜索肺癌患者肿瘤组织与正常组织中ANXA2基因的表达,肺癌肿瘤组织中ANXA2基因的表达水平高于正常组织(P<0.05)。ANXA2高表达与患者的无病生存时间、总生存时间缩短有关(均P<0.05)。ANXA2敲除组小鼠中位生存时间(43 d)相比于WT组小鼠(26 d)长(P=0.017),ANXA2表达与肺癌患者预后有关。结论ANXA2与恶性肿瘤转移密切相关,有望成为恶性肿瘤转移治疗新靶点。

关 键 词：肺肿瘤 CRISPR/Cas9  基因敲除模型  转移模型  膜联蛋白A2

分 类 号：R73]