文献类型：期刊文章

作　　者：张畅[1] 刘慕仪[3] 杨孟欣[3] 万禄明[2] 钟辉[2] 魏从文[1,2]

ZHANG Chang;LIU Mu-Yi;YANG Meng-Xin;WAN Lu-Ming;ZHONG Hui;WEI Cong-Wen(Institute of Health Science and Technology,Institute of Physical Science and Information Technology,Anhui University,Hefei 230601,China;Laboratory of Advanced Biotechnology,Academy of Military Medical Sciences,Academy of Military Sciences,Beijing 100071,China;Beijing Key Laboratory of Environmental and Viral Oncology,College of Chemistry and Life Science,Beijing University of Technology,Beijing 100124,China)

机构地区：[1]安徽大学物质科学与信息技术研究院健康科学与技术研究所,合肥230601 [2]军事科学院军事医学研究院前沿生物技术实验室,北京100071 [3]北京工业大学化学与生命科学学院环境与病毒肿瘤学北京市重点实验室,北京100124

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.270823)资助。

年　　份：2025

卷　　号：41

期　　号：3

起止页码：404-414

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、核心刊

摘　　要：蛋白质-蛋白质相互作用在细胞的生化功能中扮演极为重要的角色,深入解析蛋白质相互作用关系是理解细胞生命活动的关键。本研究以高尔基体蛋白73(golgi protein 73,GP73)为研究对象,利用经典的免疫共沉淀联合质谱技术系统挖掘了GP73的相互作用蛋白质,力求进一步解析GP73的分子功能。选取肝癌细胞系HepG2,利用慢病毒感染技术构建过表达GP73-3Flag的稳定细胞系,免疫共沉淀联合质谱检测鉴定出78个高置信的GP73相互作用蛋白质,生物信息学分析提示,GP73与近40个细胞核蛋白质存在相互作用,并参与RNA运输、剪接和翻译等生物学过程,进一步的免疫荧光和细胞核蛋白质分离实验证实,GP73在多种肿瘤细胞中的细胞核定位,在78个相互作用蛋白质的基础上进一步筛选出与mRNA剪接相关的蛋白质相互作用网络,并通过免疫共沉淀验证了GP73与HNRNPH3、SMN1、RBM14、NCBP1等7种蛋白质存在相互作用。Minigene剪接实验提示,过表达GP73抑制细胞对pre-mRNA的剪接效率。本研究拓展了对GP73蛋白功能的认识和理解,有助于解释其在细胞生物学中的重要角色及其与疾病的潜在关联。

关 键 词：蛋白质-蛋白质相互作用 高尔基体蛋白73 免疫共沉淀联合质谱检测  生物信息学分析 细胞核定位  剪接效率  

分 类 号：Q291]