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简易密封袋构建人小胶质细胞氧糖剥夺/复氧模型过程及其评价
The process and evaluation of the construction of a model of oxygen-glucose deprivation/reoxygenation in human microglia with simple sealed bags
文献类型:期刊文章
LIU Cai;ZHANG Ran;ZHU Menglin;LIAO Ming;KONG Yu;LI Shu;HONG Yun(Dept.of Ultrasound Medicine,The First Affiliated Hospital Yijishan Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241001,Anhui,China;Dept.of Gastrointestinal Surgery,The First Affiliated Hospital Yijishan Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241001,Anhui,China;Dept.of Pathophysiology,School of Basic Medical Sciences,Wannan Medical College,Wuhu 241002,Anhui,China;School of Public Health,Wannan Medical College,Wuhu 241002,Anhui,China)
机构地区:[1]皖南医学院第一附属医院弋矶山医院超声科,安徽芜湖241001 [2]皖南医学院第一附属医院弋矶山医院胃肠外科,安徽芜湖241001 [3]皖南医学院基础医学院病理生理学教研室,安徽芜湖241002 [4]皖南医学院公共卫生学院,安徽芜湖241002
基 金:安徽省高校自然科学研究重点项目(编号:2023AH051773);2022年度活性生物大分子研究安徽省重点实验室校级开放课题(编号:LAB202208);安徽省大学生创新创业训练计划(编号:S202210368011)。
年 份:2025
卷 号:46
期 号:1
起止页码:20-26
语 种:中文
收录情况:普通刊
摘 要:目的:体外构建人小胶质细胞HMC3氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,为治疗缺血性脑卒中提供新思路。方法:利用密封袋对HMC3细胞进行氧糖剥夺,缺氧不同时间后再复氧24 h。倒置显微镜下观察细胞形态,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH含量,台盼蓝染色观察细胞存活率,Hoechst/PI双染、AnnexinⅤ-FITC/PI染色观察细胞凋亡坏死情况。比较不同时间缺氧复氧24 h的结果,选择最佳缺氧时间,建立稳定的OGD/R模型。结果:与对照组(0 min)相比,OGD处理组细胞形态变圆,突起消失,胞质凝聚,胞核固缩、碎裂,细胞膜模糊不清,不规则细胞比例增多;细胞活性随缺氧时间延长明显降低(P<0.0001);上清LDH含量随缺氧时间延长而逐渐升高(P<0.01);台盼蓝染色时拒染细胞数随缺氧时间延长逐渐减少(P<0.001);细胞凋亡坏死量随缺氧时间延长逐渐增多(P<0.05)。与对照组相比,OGD/R处理组细胞形态基本正常,密度增加,随着缺氧时间延长,细胞密度增加减少;细胞活性随缺氧时间延长逐渐下降(P<0.01);上清LDH含量随缺氧时间延长发生明显上升(P<0.0001);台盼蓝染色时拒染细胞数随缺氧时间延长逐渐减少(P<0.01);细胞凋亡坏死量随缺氧时间延长逐渐增多(P<0.05)。结论:氧糖剥夺/复氧24 h后HMC3细胞存活率、LDH释放量、凋亡坏死细胞量呈时间依赖性,且缺氧45 min复氧24 h为最佳OGD/R模型时间。利用简易密封袋的方法可成功构建OGD/R模型。
关 键 词:简易密封袋 人小胶质细胞 氧糖剥夺/复氧 缺血性脑卒中
分 类 号:R363.2]
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