文献类型：期刊文章

作　　者：彭博雅[1] 池亚菲[1] 李梦[1] 吴娜[1] 陈柏安[1,2,3] 仵毅[1,2] 卢静[1,2,3]

PENG Boya;CHI Yafei;LI Meng;WU Na;CHEN Bai’an;WU Yi;LU Jing(Department of Experimental Animals,Capital Medical University,Beijing 100069,China;Department of Experimental Zoology,School of Basic Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,China;Beijing Key Laboratory of Nerve Regeneration and Repair,School of Basic Medicine,Capital Medical University,Beijing 100069,China)

机构地区：[1]首都医科大学实验动物部,北京100069 [2]首都医科大学基础医学院实验动物学学系,北京100069 [3]首都医科大学基础医学院神经再生修复研究北京市重点实验室,北京100069

出　　处：《实验动物科学》

年　　份：2024

卷　　号：41

期　　号：6

起止页码：82-86

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的构建并繁育C57BL/6J-ROSA26^(em(C3+))基因过表达小鼠,鉴定并分析其基因型和目的蛋白的表达情况,并验证检测方法的可适用性。方法将构建的C57BL/6J-ROSA26^(em(C3+))基因过表达阳性founder鼠与野生型小鼠配繁,获得的杂合子小鼠采取同胞交配方式(雌雄比1∶1),得到纯合子小鼠。使用鼠尾组织DNA PCR法鉴定杂合子及纯合子基因型,通过Western blot法检测小鼠间脑组织C3蛋白的表达差异。分析C57BL/6J-ROSA26^(em(C3+))基因过表达小鼠杂合子及纯合子的体质量变化和繁殖性能。结果C57BL/6J-ROSA26^(em(C3+))基因过表达杂合子小鼠通过同胞交配可获得纯合子小鼠。蛋白印迹法检测发现,与野生型小鼠相比,C3蛋白在基因修饰小鼠组织内高表达。C3基因的过表达不影响小鼠繁殖,纯合子间可以稳定配繁。但是,C3基因的过表达显著降低了5周龄后转基因雌鼠的体质量。结论采用全同胞交配方式,并通过PCR法进行基因型鉴定,可稳定获得C57BL/6J-ROSA26^(em(C3+))基因过表达小鼠。

关 键 词：C3 基因过表达 小鼠 繁育  PCR  Western blot  

分 类 号：Q95-3]