文献类型：期刊文章

作　　者：侯恩慧[1,2] 陈秋勇[2] 吴学敏[2] 丘镜莉[2] 吴仁杰[2] 周伦江[2] 刘玉涛[2] 马玉芳[1] 王隆柏[1,2]

HOU Enhui;CHEN Qiuyong;WU Xuemin;QIU Jingli;WU Renjie;ZHOU Lunjiang;LIU Yutao;MA Yufang;WANG Longbai(College of Animal Science,Fujian Agriculture and Forestry University/Fujian Provincial Key Laboratory of Veterinary Traditional Chinese Medicine and Animal Health,Fuzhou,Fujian 350002,China;Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Fujian Academy of Agricultural Sciences/Fujian Provincial Engineering Research Center for Animal and Poultry Disease Control,Fuzhou,Fujian 350013,China)

机构地区：[1]福建农林大学动物科学学院/福建省兽医中药与动物保健重点实验室,福建福州350002 [2]福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013

出　　处：《福建农业学报》

基　　金：福建省科技计划公益类专项(2021R10260016);福建省科技重大专项(2021NZ029023);福建省农业高质量发展超越“5511”协同创新工程项目(XTCXGC2021008)

年　　份：2024

期　　号：10

起止页码：1146-1151

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、CSCD、CSCD_E2023_2024、核心刊

摘　　要：【目的】建立一种快捷、灵敏、简便检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的RT-RAA检测方法,以提高猪流行性腹泻病毒临床检测效率。【方法】针对PEDV S基因片段保守区设计引物和探针,构建标准质粒PEDV-S,通过特异性、敏感性、重复性测定及条件优化,建立检测PEDV重组酶介导链置换核酸扩增荧光法(RT-RAA)。【结果】在42℃恒温作用20 min的条件下,建立的检测方法对检测猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)等猪源病毒均为阴性,猪流行性腹泻病毒(PEDV)为阳性;最低检出限为4.43×10^(2)拷贝·μL^(-1)的标准质粒;重复性结果显示,相同浓度标准质粒的差异性很小;利用建立的RT-RAA方法检测40份猪病毒样本,阳性率为7.5%(3/40),与实时荧光定量PCR检测结果相同。【结论】本研究建立的PEDV RT-RAA检测方法具有快速简便、耗时短、特异性高、灵敏度强和重复性好等特点,适用于对PEDV的快速诊断。

关 键 词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白 RT-RAA  

分 类 号：S855.3]