文献类型：期刊文章

作　　者：邓小亮[1] 钟秋珍[1] 付欣[1] 洪玮[1] 谭茵[1] 马文康[1]

Deng Xiaoliang;Zhong Qiuzhen;Fu Xin;Hong Wei;Tan Yin;Ma Wenkang(Guangzhou Medical University School of Life Sciences,Guangzhou 511436,China)

机构地区：[1]广州医科大学生命科学学院

出　　处：《广州医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(81500043);广州医科大学校级资助项目(L1751002)

年　　份：2019

卷　　号：0

期　　号：1

起止页码：1-5

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的:克隆中华绒螯蟹金属硫蛋白(metallothionein,MT)基因至真核表达载体,表达蛋白,为进一步研究中华绒螯蟹金属硫蛋白的结构和功能打下基础。方法:设计特异性引物,PCR扩增得到MT基因编码序列,定向克隆至带GFP标签的真核表达载体p EGFP-C1,双酶切及测序鉴定重组质粒后转染A549细胞,荧光观察及Western Blot检测目的蛋白表达情况。结果:通过双酶切和测序确认成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体;重组质粒转染A549细胞24 h后观察到了绿色荧光,细胞裂解物经过Western Blot检测到符合预期的MT-GFP融合蛋白特异性条带。结论:成功构建了中华绒螯蟹MT基因的真核表达载体,证实了该基因能在A549细胞中成功表达,为进一步研究MT的结构功能打下了基础。

关 键 词：中华绒螯蟹 金属硫蛋白 表达  

分 类 号：Q78]