文献类型：期刊文章

作　　者：陈晶晶[1] 刘玲[1] 曹梦瑶[1] 刘婉仪[1]

CHEN Jing-jing;LIU Ling;CAO Meng-yao;LIU Wan-yi(Department of Pharmacy,Medical College,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,Henan Province,China)

机构地区：[1]河南科技大学医学院药学系

出　　处：《中国临床药理学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81502627);河南省高等学校青年骨干教师培养计划课题资助项目(2016GGJS-065)

年　　份：2019

卷　　号：35

期　　号：19

起止页码：2356-2360

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSA、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究PABA/一氧化氮(NO)经活性氧-线粒体膜电位(ROS-MMP)途径对人肝癌Hep G2细胞凋亡的影响。方法设立空白组(只加等量二甲亚砜,终浓度<0.01%)和低、中、高剂量实验组(PABA/NO 7.5,15.0和30.0μmol·L-1)。处理细胞24 h后,用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平,用JC-1荧光探针检测细胞MMP。另设空白组、N-乙酰半胱氨酸组(NAC)、还原型谷胱甘肽组(GSH)、PABA/NO组、NAC+PABA/NO组和GSH+PABA/NO组,用膜联蛋白(Annexin)Ⅴ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,用蛋白质印迹法检测MAPK和活化胱天蛋白酶3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达的变化。结果空白组和低、中、高剂量实验组ROS荧光强度分别为(198.67±26.58),(289.67±40.15),(515.33±58.73)和(954.33±84.51),绿/红荧光比值别为(5.56±0.28),(6.44±0.18),(7.80±0.37)和(8.38±0.41),低、中、高剂量实验组和空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空白组、NAC组、GSH组、PABA/NO组、NAC+PABA/NO组和GSH+PABA/NO组的绿/红荧光比值分别为(5.87±0.25),(5.77±0.30),(5.61±0.45),(7.77±0.40),(6.31±0.26)和(6.09±0.56),凋亡率分别为(7.20±1.47)%,(6.53±0.65)%,(7.47±0.85)%,(82.47±2.95)%,(52.07±2.23)%,(68.83±1.10)%,NAC+PABA/NO组,GSH+PABA/NO组与PABA/NO组相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Western蛋白质印迹结果显示,PABA/NO引起p-ERK表达下调、p-JNK、p-p-38及cleaved-Caspase-3表达上调;与PABA/NO组比,加入NAC,GSH后可逆转PABA/NO引起的p-ERK表达下调,对p-JNK、p-p-38及cleaved-Caspase-3表达的上调也有一定的逆转作用。结论 PABA/NO通过增加ROS水平,引起p-ERK表达下调,p-JNK和p-p-38表达上调,最终引起cleaved-Caspase-3表达上调引导细胞凋亡。

关 键 词：一氧化氮 一氧化氮供体 偶氮鎓二醇盐  细胞凋亡

分 类 号：R96]