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期刊文章详细信息

枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析    

Cloning and Sequencing of the proBA Gene from the Selected Mutant Resistant to Proline Analogue from Bacillus subtilis

  

文献类型:期刊文章

作  者:苗丽霞[1] 曹军卫[1] 刘瑞杰[1] 王友亮[1] 曾永辉[1]

机构地区:[1]武汉大学生命科学学院生物技术系,武汉430072

出  处:《Acta Genetica Sinica》

基  金:武汉大学科技创新基金~~

年  份:2002

卷  号:29

期  号:12

起止页码:1111-1117

语  种:中文

收录情况:AJ、BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘  要:利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因 ,得到一个约 2 3kb的DNA片段 ,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因。与野生菌株的proB基因相比 ,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变 ,其中一个碱基的变化 (从起始密码子开始第 781位由T→A)导致了一个氨基酸发生改变 (Ser→Thr) ,另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株 ,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现 ,其与proB基因头尾重叠 ,在proA基因起始密码子上游第 14个碱基处有一个类似于SD的序列 ,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌 16 8的同源性为 77%

关 键 词:枯草芽孢杆菌 抗脯氨酸结构类似物突变株  筛选  proBA基因  克隆 序列分析  

分 类 号:Q75]

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