文献类型：期刊文章

作　　者：占乐杨[1] 苟婧萱[1] 张曼琪[1] 傅唯轩[1] 兰守信[1] 涂健[1] 王振宇[1] 邵颖[1] 宋祥军[1]

ZHAN Leyang;GOU Jingxuan;ZHANG Manqi;FU Weixuan;LAN Shouxin;TU Jian;WANG Zhenyu;SHAO Ying;SONG Xiangjun(College of Animal Science and Technoogy,Anhui Agricultural University,Hefei 230000,China)

机构地区：[1]安徽农业大学动物科技学院兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室,安徽合肥230000

出　　处：《畜牧兽医学报》

基　　金：2022年国家级大学生创新创业训练计划项目(S202210364039,S202210364026);2023年安徽农业大学省级大学生创新创业训练计划项目(X202310364040)。

年　　份：2024

卷　　号：55

期　　号：10

起止页码：4660-4669

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、CAB、CAS、CSCD、CSCD2023_2024、EMBASE、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：旨在探究Ⅵ型分泌系统(TypeⅥsecretion systems,T6SS)的毒力效应蛋白Tae4酰胺酶对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)及产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)的抑菌作用。将pET-28a-Tae4重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21(Escherichia coli BL21,E.coli BL21)进行目的蛋白诱导表达,优化IPTG的诱导时间、浓度、温度,最后纯化后的Tae4蛋白通过琼脂孔扩散试验、最小抑菌浓度测定、抗生素联用抑菌试验分别作用于S.aureus和L.monocytogenes。SDS-PAGE电泳结果显示,本试验中重组蛋白诱导表达最佳条件为:IPTG终浓度为0.5 mmol·L^(-1),16℃诱导16 h。重组蛋白大小约为21 ku,可溶性表达于培养上清中。琼脂孔扩散试验结果显示,Tae4蛋白浓度500μg·mL^(-1)时S.aureus菌株均出现13mm以上抑菌圈,效果与菌株血清型有关,L.monocytogenes菌株均出现18mm以上抑菌圈;最小抑菌浓度试验结果显示,Tae4蛋白对S.aureus的MIC约为250μg·mL^(-1),对L.monocytogenes的MIC约为125μg·mL^(-1),点板法和微量肉汤稀释法结果一致;抗生素联用抑菌试验结果显示,Tae4蛋白与青霉素(penicillin,PG)联合使用均比单独使用的抑菌效果要好,且对L.monocytogenes的抑菌效果优于S.aureus。综上,Tae4蛋白对金黄色葡萄球菌和产单核细胞李氏杆菌具有抑菌效果,与青霉素联用抑菌效果得到了增强,为后续抗生素替代提供理论依据。

关 键 词：Tae4  Ⅵ型分泌系统  金黄色葡萄球菌 产单核细胞李氏杆菌  抗生素替代

分 类 号：S859.796]