文献类型：期刊文章

作　　者：朱昌龙[1,2] 余珊[1,2] 李悦冰[1,2] 李博[1,2,3]

Zhu Changlong;Yu Shan;Li Yuebing;Li Bo(Department of Pharmaceutical Analysis,China Pharmaceutical University,Nanjing Jiangsu 210009,China;Key Laboratory of Protein Chemistry and Structure Biology,China Pharmaceutical University,Nanjing Jiangsu 210009,China;Institute of Innovative Pharmaceutical Research,China Pharmaceutical University(Hangzhou),Hangzhou Jiangsu 310018,China)

机构地区：[1]中国药科大学药物分析系,江苏南京210009 [2]中国药科大学蛋白质化学与结构生物学重点实验室,江苏南京210009 [3]中国药科大学(杭州)创新药物研究院,浙江杭州310018

出　　处：《山西化工》

年　　份：2024

卷　　号：44

期　　号：9

起止页码：55-60

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的:建立β淀粉样蛋白中Asp外消旋化的LC-MS/MS分析方法。方法:采用胰蛋白酶和Glu-C酶两步酶解β淀粉样蛋白,酶解产物LC-MS/MS分析的色谱条件:分离柱为InfinityLab Poroshell 120 EC-C18色谱柱(2.7μm,3.0×150 mm Agilent),流动相A为5%乙腈-0.1%甲酸水,流动相B为75%乙腈-水,梯度洗脱(0~30 min,0~28%B;30~30.01 min,28%~100%B;30.01~35 min,100%~100%B;35.0~35.01 min,100%~0%B;35.01~40 min,0%B),流速为0.3 mL/min。质谱条件:采用电喷雾离子源及正离子多反应监测模式(SRM)定量。结果:在L型多肽存在下,D型多肽的质量浓度在1~250 ng/mL内,其峰面积与多肽的质量浓度之间线性良好(r>0.999),最低定量限(LLOQ)为1 ng/mL;LLOQ、低(LQC)、中(MQC)、高浓度(HQC)日内和日间精密度RSD值均小于15%,加样回收率为85.3%~107.3%。建立的方法对D/(D+L)型淀粉样蛋白为2%~50%的混合样本中Asp1,Asp23外消旋化测定结果准确,准确度在95.35%~117%之间。联合胰蛋白酶与Glu-C成功鉴定了淀粉样蛋白中Asp7残基的外消旋化。结论:所建立的方法可用于淀粉样蛋白中Asp残基外消旋化的分析,该方法操作简便,结果准确,灵敏度高。

关 键 词：Β淀粉样蛋白 外消旋化  液质联用 天冬氨酸

分 类 号：O657]