文献类型：期刊文章

作　　者：袁博[1,2,3] 谢佳忆[4] 江思瑜[1,5] 孟亚军[1] 朱清华[1] 李晓飞[1] 付秀美[1,3] 谢利德[1]

YUAN Bo;XIE Jiayi;JIANG Siyu;MENG Yajun;ZHU Qinghua;LI Xiaofei;FU Xiumei;XIE Lide(Department of Human Anatomy,School of Basic Medical Sciences,Chengde Medical University,Chengde 067000,China;Department of Pathogens and Immunology,Chengde Nursing Vocational College,Chengde 067000,China;Key Laboratory of Nerve Injury and Repair of Hebei Province,Chengde 067000,China;Department of Automation,School of Information Science and Technology,Tsinghua University,Beijing 100062,China;Central Laboratory,First Hospital,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050000,China)

机构地区：[1]承德医学院基础医学院人体解剖学教研室,河北承德067000 [2]承德护理职业学院病原生物与免疫教研室,河北承德067000 [3]河北省神经损伤与修复重点实验室,河北承德067000 [4]清华大学信息科学技术学院自动化系,北京100062 [5]河北医科大学第一医院中心实验室,河北石家庄050000

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：河北省科技厅自然科学基金项目(H2021406056);河北省高等学校科学研究计划项目(ZD2020178);承德医学院人体解剖与组织胚胎学优势学科资助项目([2023] 22号);河北省神经损伤与修复重点实验室开放项目(NJKF-202403)。

年　　份：2024

卷　　号：50

期　　号：3

起止页码：718-727

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、CAS、CSCD、CSCD_E2023_2024、EMBASE、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测ADSCs的多向分化潜能。采用Western blotting法和免疫荧光法检测ADSCs标记物CD29及CD44阳性表达情况,采用外泌体(Exos)分离试剂盒提取ADSC-Exos,透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪检测ADSC-Exos的形态大小和粒径分布范围,Western blotting法检测Exos特异性标记物CD9和TSG101蛋白表达情况,示踪法观察巨噬细胞摄取ADSC-Exos情况。将巨噬细胞RAW264.7分为对照组、10 mg·L^(-1)ADSCExos组、20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组。5-乙基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色检测各组巨噬细胞活性,Transwell小室实验检测各组巨噬细胞迁移细胞数,荧光显微镜观察各组巨噬细胞黏附情况。结果:原代ADSCs培养24 h后细胞贴壁生长,呈散在、长梭形;培养7 d,贴壁细胞呈齿梳状、旋涡状有序排列,呈成纤维细胞样外观;培养10代后ADSCs形态不规则,增殖速度减慢。分离提取的ADSCs具有成骨和成脂分化潜能,CD29和CD44蛋白表达阳性。透射电子显微镜下ADSC-Exos呈茶碟状,ADSC-Exos的粒径主峰分布于132 nm附近,ADSC-Exos中CD9和TSG101蛋白表达阳性,即ADSC-Exos提取成功。荧光显微镜下RAW264.7细胞核周围可检测到红色荧光信号,即ADSC-Exos可以被巨噬细胞摄取。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40

关 键 词：脂肪干细胞 外泌体 巨噬细胞 细胞迁移 细胞黏附

分 类 号：Q25]