文献类型：期刊文章

作　　者：齐爽[1] 孙旋旋[1] 王绮萱[1] 贺意婷[1] 李佳睿[1] 苏敬阳[1,2] 郝丽英[1]

QI Shuang;SUN Xuanxuan;WANG Qixuan;HE Yiting;LI Jiarui;SU Jingyang;HAO Liying(Department of Pharmaceutical Toxicology,School of Pharmacy,China Medical University,Shenyang 110122,China;Department of Clinical Pharmacology,School of Pharmacy,China Medical University,Shenyang 110122,China)

机构地区：[1]中国医科大学药学院药物毒理学教研室 [2]中国医科大学药学院临床药理学教研室,沈阳110122

出　　处：《中国医科大学学报》

基　　金：辽宁省大学生创新训练项目(S202210159031,S20231015944,S202310159018);医学电生理学教育部重点实验室开放基金(KeyME-2019-07)。

年　　份：2024

卷　　号：53

期　　号：6

起止页码：495-500

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、CAB、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨β淀粉样蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))与钙调蛋白(CaM)的结合作用。方法采用生物信息学方法获取阿尔茨海默病(AD)异常表达的核心基因,预测AD防治的潜在靶蛋白;通过基因重组的方法构建GST-Aβ_(1-42)重组质粒并进行DNA测序;琼脂糖凝胶电泳进行重组质粒的酶切鉴定;提取纯化GST-Aβ_(1-42)融合蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定是否纯化成功;GST pull-down检测质粒表达的GST-Aβ_(1-42)蛋白与CaM的结合作用。结果获取连接度排名前20的核心基因,将CaM作为靶蛋白;质粒的DNA测序结果证明重组质粒构建成功,琼脂糖凝胶电泳结果显示,酶切后的片段与Aβ_(1-42)片段分子量大小理论值符合,进一步证明重组质粒构建成功;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示GST-Aβ_(1-42)蛋白能够与CaM结合,并具有浓度依赖性。结论Aβ_(1-42)重组质粒构建成功,且与CaM具有结合作用。

关 键 词：Β淀粉样蛋白 质粒构建 钙调蛋白 结合能力  活性鉴定

分 类 号：R966]