文献类型：期刊文章

作　　者：郑松[1] 储超群[2] 岳琳[2] 黄申卓凡[2] 温家根[2]

Zheng Song;Chu Chaoqun;Yue Lin;Huangshen Zhuofan;Wen Jiagen(Dept of Tuberculosis,Anhui Chest Hospital,Hefei 230032;Dept of Basic and Clinical Pharmacology,School of Pharmacy,Anhui Medical University,Hefei 230032)

机构地区：[1]安徽省胸科医院结核科,合肥230032 [2]安徽医科大学药学院基础与临床药理学教研室,合肥230032

出　　处：《安徽医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金青年项目(编号:81800606);安徽省转化医学研究院科研基金项目(编号:2022zhyx-C08);安徽医科大学药学创新基金科研项目(编号:YXCX202203)。

年　　份：2024

卷　　号：59

期　　号：4

起止页码：653-659

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨建立阿米卡星(AKN)体外肾损伤模型的方法,研究在AKN体外肾损伤模型中王不留行黄酮苷(VA)的保护作用及机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),孵育不同浓度的AKN或VA,MTT法检测细胞活力,确定药物浓度;采用二氢乙锭(DHE)探针和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)检测试剂盒检测细胞内氧化应激状态的变化;提取总RNA,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾损伤分子-1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)基因表达的变化;提取总蛋白,Western blot检测铁死亡相关的蛋白溶质载体蛋白家族47成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的水平。结果高浓度AKN在体外可以显著引起HK-2细胞活力的下降,AKN对HK-2细胞的半数抑制浓度(IC50)为(5.74±0.47)mmol/L。25~100μmol/L的VA可以提高AKN刺激后的HK-2细胞活力(P<0.05)。AKN(4 mmol/L)处理后,KIM-1和NGAL的mRNA表达水平显著高于阴性对照(NC)组(P<0.001);VA(50μmol/L)可以显著降低KIM-1(P<0.01)和NGAL(P<0.05)的mRNA表达水平。AKN处理3 h后DHE染色强度升高但差异无统计学意义,6~24 h后DHE染色强度显著大于0 h组(P<0.01)。此外,AKN处理6~24 h后MDA水平显著上升,GSH水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。AKN刺激6~24 h后,铁死亡相关蛋白SLC7A11和GPX4表达均明显下降(P<0.001)。VA同时孵育24 h,显著逆转DHE染色、GSH和MDA水平的变化及SLC7A11和GPX4蛋白的下降(P<0.001)。结论该研究通过高浓度AKN体外刺激HK-2细胞建立AKN体外肾损伤模型,并发现VA可能通过抑制过氧化应激相关的铁死亡途径减轻AKN导致的肾小管细胞损伤。

关 键 词：阿米卡星 肾小管上皮细胞 王不留行黄酮苷  氧化应激 铁死亡  药物性肾损伤

分 类 号：R965.1]