文献类型：期刊文章

作　　者：郝经伟[1] 潘婷[1] 李月[2] 朱文斌[3] 段文博[1] 刘立琨[3] 岳丽玲[3] 刘云龙[4] 高秀丽[3]

HAO Jing-wei;PAN Ting;LI Yue;ZHU Wen-bin;DUAN Wen-bo;LIU Li-kun;YUE Li-ling;LIU Yun-long;GAO Xiu-li(Department of Medical Technology,Qiqihar Medical University,Heilongjiang Qiqihar 161006,China;Department of Pharmacy,Qiqihar Medical University,Heilongjiang Qiqihar 161006,China;Laboratory of Oncomolecularbiology,Research Institute of Medicine and Pharmacy,Qiqihar Medical University,Heilongjiang Qiqihar 161006,China;Department of Oncological Surgery,the Second Affiliated Hospital,Qiqihar Medical University,Heilongjiang Qiqihar 161006,China)

机构地区：[1]齐齐哈尔医学院医学技术学院,黑龙江齐齐哈尔161006 [2]齐齐哈尔医学院药学院,黑龙江齐齐哈尔161006 [3]齐齐哈尔医学院医药科学研究院,肿瘤分子生物学研究室,黑龙江齐齐哈尔161006 [4]齐齐哈尔医学院附属第二医院肿瘤外科,黑龙江齐齐哈尔161006

出　　处：《解剖学报》

基　　金：国家自然科学基金(81972491);黑龙江省教育厅面上项目(2022-KYYWF-0831);齐齐哈尔医学科学院临床科研基金(QMSI2021L-14);齐齐哈尔医学院研究生创新基金(QYYCX2022-18)。

年　　份：2024

卷　　号：55

期　　号：2

起止页码：196-202

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD2023_2024、EMBASE、JST、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的明确女性乳腺癌中核仁磷蛋白(NPM)乙酰化修饰水平,并通过修饰位点突变体的构建探讨其功能。方法蛋白质修饰组学方法检测对比人乳腺癌组织及癌旁正常组织(各3例)NPM乙酰化水平及乙酰化位点;基因定点突变PCR构建NPM乙酰化突变体,限制性内切酶(DpnI)消化及大肠埃希菌转化获得特异性突变体重组质粒;双酶切与测序验证各突变体序列准确性;瞬时转染及RT-PCR方法检测各突变体过表达效果。Western blotting验证NPM乙酰化水平,蛋白质定量组学及生物信息学分析NPM乙酰化功能。结果乳腺癌组织样本中NPM第27及第32位赖氨酸乙酰化水平分别为癌旁正常组织的2.76及2.22倍;构建的NPM乙酰化位点突变体与野生型NPM分子量一致且出现预期突变位点;转染NPM各突变体的BT-549细胞相应NPM mRNA表达水平明显升高。随着野生型NPM表达水平增加,蛋白乙酰化水平增加,27位赖氨酸发生负向突变后,修饰水平下降。NPM乙酰化可使BT-549细胞中101种蛋白表达水平发生明显变化,上述蛋白在细胞大分子生物合成,以DNA为模板的转录过程,RNA生物合成以及RNA代谢过程中富集。结论乳腺癌NPM呈高乙酰化水平并可能在细胞大分子生物合成,转录过程,RNA生物合成以及RNA代谢过程中发挥关键功能。

关 键 词：乳腺癌 核仁磷蛋白乙酰化  定点突变 蛋白质组学 人  

分 类 号：R34[基础医学类]