文献类型：期刊文章

作　　者：杨玲[1] 袁露[1] 杨凡[1] 葛婷婷[1] 徐文华[1] 许林巍[1] 牛长敏[1] 郑英[1]

YANG Ling;YUAN Lu;YANG Fan;GE Tingting;XU Wenhua;XU Linwei;NIU Changmin;ZHENG Ying(Institute of Obstetrics,Gynecology and Reproduction,Department of Histology and Embryology,School of Medicine,Yangzhou University,Yangzhou 225001,China)

机构地区：[1]扬州大学医学院妇产与生殖医学研究所,组织学与胚胎学教研室,江苏扬州225001

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(82071696)。

年　　份：2023

卷　　号：39

期　　号：10

起止页码：933-939

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD_E2023_2024、IC、JST、PUBMED、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备兔抗小鼠睾丸表达蛋白38(TEX38)的多克隆抗体。方法以小鼠TEX38真核表达质粒pCDNA3.1-TEX38为模板扩增出TEX38可读框全长序列,并将其与pET-30a(+)连接,构建pET-30a-TEX38原核表达质粒。将重组质粒转化到大肠杆菌E.coli BL21中,并采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。将其纯化和复性后,作为抗原免疫新西兰大白兔,抽取血清获得TEX38多克隆抗体。用ELISA检测免疫后的血清效价,Western blot法和免疫荧光染色法分别鉴定多克隆抗体的特异性。结果成功构建了pET-30a-TEX38重组质粒,并成功表达和纯化了TEX38原核蛋白。免疫后,5只兔血清的抗体滴度均达到1∶1000000。通过Western blot法和免疫荧光染色验证,表明抗体特异性较好,TEX38主要定位于小鼠睾丸生精细胞和精子。结论成功制备了兔抗小鼠TEX38多克隆抗体,并确定TEX38可在小鼠睾丸生精细胞和精子表达。

关 键 词：睾丸表达蛋白38(TEX38)  多克隆抗体 精子发生

分 类 号：S852.4]