文献类型：期刊文章

作　　者：张旭东[1,2] 单李天一[1] 王蓉[1] 刘树义[1] 兰凯[1] 陈敏[1] 廉婷[3] 李凯[1,4] Rajiv Kumar JHA[1,2]

ZHANG Xudong;SHAN Litianyi;WANG Rong;LIU Shuyi;LAN Kai;CHEN Min;LIAN Ting;LI Kai;Rajiv Kumar JHA(China-Nepal Friendship Medical Research Center of Rajiv Kumar Jha,Xi'an,Shaanxi Province,710021;Xi'an Key Laboratory of Innovative and Translational Cancer Early Diagnosis,Xi'an,Shaanxi Province,710021;Research Center for Prevention and Treatment of Respiratory Disease,School of Clinical Medicine,Xi'an Medical University,Xi'an,Shaanxi Province,710021;Department of Neurology,First Affiliated Hospital of Xi'an Medical University,Xi'an,Shaanxi Province,710077,China)

机构地区：[1]西安医学院临床医学院中尼友好拉吉姆医学实验室,西安710021 [2]西安医学院临床医学院西安市肿瘤早诊创新转化重点实验室,西安710021 [3]西安医学院临床医学院陕西省呼吸病预防与诊治工程研究中心,西安710021 [4]西安医学院第一附属医院神经内科,西安710077

出　　处：《陆军军医大学学报》

基　　金：陕西省高校青年人才托举计划项目(20200314);陕西省科技厅面上项目(2021JM-495);陕西省教育厅专项科研计划项目(21JK0890);大学生创新创业训练计划(S202111840075)。

年　　份：2023

卷　　号：45

期　　号：18

起止页码：1916-1926

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2023_2024、DOAJ、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨沉默调节蛋白3(sirtuin 3,Sirt3)在胶质瘤细胞U87中的作用,为胶质瘤的早期诊治提供新靶点。方法基于中国脑胶质瘤数据库(CGGA)、GEPIA2数据库,通过生物信息学分析Sirt3在胶质瘤不同分级的表达情况,通过Western blot检测6位胶质瘤患者癌旁与肿瘤组织中Sirt3的蛋白水平。利用shRNA慢病毒、CRISPR/Cas9系统干预U87细胞Sirt3的表达,采用TUNEL染色、PI-Annexin V双荧光标记检测细胞凋亡情况,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-caspase3及LAMP1、LAMP2、LAMP2A、TFEB、mTOR等蛋白的表达。利用mTOR小分子抑制剂Rapamycin处理Sirt3敲减U87细胞,检测相关蛋白及细胞凋亡的变化。对Sirt3敲除前后的U87细胞进行核质分离实验,并检测p-TFEB蛋白表达的变化。在敲减及敲除Sirt3的U87细胞中分别过表达TFEB及Sirt3后,检测溶酶体膜蛋白表达的变化情况。结果Sirt3在高级别胶质瘤中高表达,且与患者的低生存率密切相关。敲减Sirt3表达后细胞凋亡增加(P<0.01),溶酶体膜蛋白LAMP1、LAMP2、LAMP2A显著下调(P<0.01),p-mTOR显著增加(P<0.01),通过核质分离实验发现敲除Sirt3后p-TFEB在胞质中增加(P<0.01)。在Sirt3敲除组过表达Sirt3后,LAMP1、LAMP2蛋白水平恢复,且溶酶体数量显著增加(P<0.01);在Sirt3敲减组过表达TFEB后,LAMPs蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论Sirt3可能通过调控mTOR信号通路影响TFEB的核质分布,上调溶酶体膜蛋白LAMPs表达增强胶质瘤细胞溶酶体功能,进而促进胶质瘤细胞存活和恶性增殖,提示Sirt3可能是胶质瘤临床诊断和进展的分子标志物。

关 键 词：沉默调节蛋白Sirt3  胶质瘤  凋亡  溶酶体 雷帕霉素靶蛋白 转录因子EB  

分 类 号：R394.3] R730.23[基础医学类] R739.41