文献类型：期刊文章

作　　者：梁羽[1,2] 谭旭[1,2] 邹琼怡[1,2] 赖扬帆[1,2] 梁燕[1,2]

LIANG Yu;TAN Xu;ZOU Qiongyi;LAI Yangfan;LIANG Yan(Department of Endodontics,School of Stomatology,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,Guizhou,China;Department of Endodontics,Stomatological Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang 550004,Guizhou,China)

机构地区：[1]贵州医科大学口腔医学院牙体牙髓病学教研室,贵州贵阳550004 [2]贵州医科大学附属口腔医院牙体牙髓科,贵州贵阳550004

出　　处：《贵州医科大学学报》

基　　金：贵州医科大学学术新苗项目(黔科合平台人才〔2017〕5718)。

年　　份：2023

卷　　号：48

期　　号：8

起止页码：914-924

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探讨脂多糖(LPS)诱导分泌的外泌体对人牙髓干细胞(HDPSC)牙源性分化的影响及机制。方法提取、分离及培养HDPSC,采用流式细胞术及Western blot鉴定细胞,观察成牙/成骨、成脂诱导HDPSC多向分化,筛选最适浓度LPS诱导HDPSC分泌外泌体、并提取外泌体,将HDPSC分为阴性对照组(PBS)、正常外泌体HDPSC组(N-HDPSC exo)及LPS诱导HDPSCs分泌的外泌体组(L-HDPSC exo),采用细胞增殖检测(MTT)法和流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡情况,碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组HDPSC成骨分化表达,采用实时荧光定量PCR检测各组HDPSCs中ALP、重组人牙本质基质蛋白1(DMP-1)、牙本质涎蛋白(DSP)及核心结合蛋白因子2(RUNX2)成骨标志基因的表达,采用Western blot检测各组HDPSCs中转化生长因子-β(TGFβ1)、转化生长因子β受体(TGFβR1)、磷酸化SMAD家族成员2/3(p-SMAD2/3)、SMAD蛋白家族成员2/3(SMAD2/3)及SMAD蛋白家族成员4(SMAD4)蛋白的表达。结果成功分离培养并鉴定的牙髓干细胞,成脂诱导可见红色发亮脂滴,成骨诱导可见钙化结节;LPS诱导HDPSC分泌的外泌体符合其结构特征并且可被HDPSC所摄取;L-HDPSC exo组较N-HDPSC exo组和PBS组细胞增殖能力增加、凋亡水平下降、ALP染色程度增加(P<0.05),ALP、DMP-1、DSP及RUNX2表达增加(P<0.05),TGFβ1、TGFβR1、p-SMAD2/3、SMAD2/3及SMAD4表达增加(P<0.05)。结论LPS诱导HDPSC分泌的外泌体可促进HDPSC增殖及细胞活力,并可促进其向成牙/成骨向分化,机制可能与调控TGFβ1/SMADs信号通路、参与诱导正常牙髓干细胞牙源性分化有关。

关 键 词：外泌体 脂多糖 人牙髓干细胞 共培养  TGFβ1/SMADs信号通路  牙源性分化  

分 类 号：R781.32[口腔医学类]