文献类型：期刊文章

作　　者：成小蓉[1] 刘蕊蕊[1] 潘飞飞[1] 黄栋[1]

Cheng Xiaorong;Liu Ruirui;Pan Feifei;Huang Dong(Department of Pediatric Intensive Care Medicine,Affiliated People′s Hospital of Guizhou Medical University,Guizhou Provincial People′s Hospital,Guiyang 550002,China)

机构地区：[1]贵州医科大学附属人民医院,贵州省人民医院儿童重症医学科,贵阳550002

出　　处：《中国医药》

基　　金：贵州省科技计划(黔科合基础-ZK[2021]一般369)。

年　　份：2023

卷　　号：18

期　　号：8

起止页码：1165-1169

语　　种：中文

收录情况：JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。方法将A549细胞(腺癌人类肺泡基底上皮细胞)一定条件培养后分成对照组、支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组。支气管肺发育不良组、雷帕霉素干预组高氧环境培养,置于37℃、85%氧气孵化箱中培养48 h,前者不加药剂、后者加10μmol/L的雷帕霉素干预;对照组常规环境培养,置于37℃、5%二氧化碳孵化箱中培养48 h,不加药剂。利用高氧构建支气管肺发育不良的细胞模型,利用蛋白质印迹实验和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验验证自噬对高氧处理后A549细胞肺泡表面标志物合成蛋白复合物(SPC)、水通道蛋白5(AQP5)的影响,利用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测自噬对高氧处理后A549细胞增殖的影响,利用蛋白质印迹实验验证PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中的作用。结果蛋白质印迹实验和RT-qPCR实验表明自噬激活剂雷帕霉素挽救了高氧处理后A549细胞SPC、AQP5表达的下调。EdU实验表明雷帕霉素显著促进了高氧处理后A549细胞的增殖,EdU阳性细胞百分比高于支气管肺发育不良组[(0.48±0.06)比(0.36±0.02)](P<0.05)。蛋白质印迹实验显示雷帕霉素干预后的A549细胞中的磷酸化-PI3K、磷酸化-Akt、磷酸化-mTOR、自噬选择性底物P62的表达水平显著降低,微管相关蛋白1轻链3的表达水平显著上升(均P<0.05)。结论PI3K/Akt/mTOR自噬通路在支气管肺发育不良中发挥着重要作用。

关 键 词：支气管肺发育不良 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路  自噬 雷帕霉素

分 类 号：R563]