文献类型：期刊文章

作　　者：王政臻[1] 黄俊卿[2] 杨彬[2] 李琳[2] 董佳安[1] 杨顺[1]

WANG Zhengzhen;HUANG Junqing;YANG Bin;LI Lin;DONG Jiaan;YANG Shun(College of Orthopedics,Henan University of Chinese Medicine,Zhengzhou 450000,China;Henan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine/The Second Affiliated Hospital of Henan University of Chinese Medicine,Zhengzhou 450000,China)

机构地区：[1]河南中医药大学骨伤学院,郑州450000 [2]河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院,郑州450000

出　　处：《中国实验方剂学杂志》

基　　金：2019年河南省中医药科学研究专项项目(2019JDZX095);全国中医临床特色技术传承人才项目(国中医药人教函[2019]36号)。

年　　份：2023

卷　　号：29

期　　号：16

起止页码：33-42

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2023_2024、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:研究身痛逐瘀汤含药血清对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞氧化应激及凋亡的保护作用。方法:50只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(1.73、3.46、6.92 g·kg^(-1))和硫酸氨基葡萄糖(0.3 g·kg^(-1)),连续给药2周后收集血清。构建KOA模型,分离软骨细胞,随机分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清低、中、高剂量组及硫酸氨基葡萄糖组。软骨细胞培养过程中添加磷酸腺苷(AMP)依赖的蛋白激酶(AMPK)抑制剂Compound C(10μmol·L^(-1)),分为正常组、模型组、身痛逐瘀汤含药血清组、Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组。5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖;原位末端标记法(TUNEL)测定凋亡;DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平;比色法测定谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、MMP-13、胶原酶Ⅱ型(ColⅡ)和聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Weatern blot)检测磷酸化(p)-AMPK及沉默信息调节因子1(Sirt1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组软骨细胞增殖率、GSH活性、ColⅡ与Aggrecan mRNA表达、p-AMPK和Sirt1蛋白水平显著降低(P<0.01),而ROS水平、MDA含量、TUNEL阳性细胞率、MMP-3与MMP-13 mRNA表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,身痛逐瘀汤含药血清能提高KOA大鼠软骨细胞中EdU阳性细胞数、GSH活性、ColⅡ和Aggrecan mRNA表达水平、p-AMPK和Sirt1蛋白水平(P<0.05,P<0.01),而TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA表达水平则明显降低(P<0.05,P<0.01)。与身痛逐瘀汤含药血清组比较,Compound C+身痛逐瘀汤含药血清组细胞p-AMPK和Sirt1蛋白表达、GSH活性、ColⅡ和Aggrecan mRNA水平明显降低(P<0.01),TUNEL阳性细胞率、ROS水平、MDA含量、MMP-3和MMP-13 mRNA水平显著升高(P<0.01)。结论:身痛逐瘀汤含药血清能减弱KOA大鼠软

关 键 词：身痛逐瘀汤 膝骨关节炎  氧化应激  细胞凋亡  AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)  沉默信息调节因子1(Sirt1)  

分 类 号：R2-0[中医学类] R22R285.5R289R33