文献类型：期刊文章

作　　者：孙瑞婧[1] 王玉芳[2] 王朝喆[1] 吴沄桦[1] 都鹏超[1] 毕可红[3] 姜国胜[1]

SUN Rujjing;WANG Yufang;WANG Chaozhe;WU Yunhua;DU Pengchao;BI Kehong;JIANG Guosheng(Department of Immunology,School of Basic medicine,Binzhou Medical University,Yantai 264003,China;Department of Laboratory Medicine,Fushan District People's Hospital,Yantai 265500,China;Department of Hematology,First Af filiated Hospital of Shandong First Medical University(Shandong Academy of Medical Sciences),Jinan 250062,China)

机构地区：[1]滨州医学院基础医学院免疫学教研室,山东烟台264003 [2]烟台市福山区人民医院检验科,山东烟台265500 [3]山东第一医科大学(山东省医学科学院)第一附属医院血液科,山东济南250062

出　　处：《中华肿瘤防治杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81573467);山东省自然科学基金青年项目(ZR2020QH160);山东省自然科学基金面上项目(ZR2021MH080);济南市临床医学科技创新项目(202134001)。

年　　份：2023

卷　　号：30

期　　号：10

起止页码：577-586

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、EMBASE、IC、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨miR-let-7c-5p/c-myc信号轴在白血病细胞定向单核/巨噬细胞分化中的调控作用。方法采用PMA+LPS+IFN-γ诱导THP-1白血病细胞向单核/巨噬细胞定向分化,PBS作为对照组。诱导48 h后CCK8法测定细胞增殖水平;流式细胞仪测定细胞CD11b与CD14分化抗原表达水平;RT-qPCR检测白血病细胞分化前后miR-let-7c-5p和c-myc的表达变化;蛋白质印迹法检测c-myc蛋白表达变化;双荧光素酶结合实验检测miR-let-7c-5p与c-myc的3′UTR靶向结合和活性调控关系;转染miR-let-7c-5p mimic观察c-myc表达变化后细胞的增殖分化水平变化;过表达c-myc拯救实验观察miR-let-7c-5p对PMA+LPS+IFN-γ诱导的THP-1细胞增殖分化的影响。THP-1细胞转染miR-let-7c-5p inhibitor,观察c-myc表达变化对THP-1定向分化为M1样巨噬细胞的影响。结果与PBS对照组相比,PMA+LPS+IFN-γ诱导48 h后,THP-1细胞的增殖能力明显降低(0.64±0.01 vs 0.33±0.01,t=45.190,P<0.001)。PMA+LPS+IFN-γ实验组的CD11b和CD14平均阳性表达率升高[(5.51±0.89)%vs(17.72±0.86)%,t=17.050,P<0.001;(6.22±0.70)%vs(16.42±0.14)%,t=24.650,P<0.001]。PMA+LPS+IFN-γ实验组的c-myc蛋白表达水平降低(0.87±0.02 vs 0.64±0.06,t=6.041,P=0.004)。PMA+LPS+IFN-γ实验组的miR-let-7c-5p基因表达量高于对照组,而c-myc基因表达量低于对照组,均P<0.001。Luciferase实验证实,miR-let-7c-5p mimic+c-myc-WT组的荧光素酶活性明显低于mimics NC+c-myc-WT组(0.88±0.09 vs 0.62±0.05,t=4.320,P=0.013)。转染miR-let-7c-5p mimic后,miR-let-7c-5p mimic组的c-myc蛋白表达水平低于miR-let-7c-5p mimic NC组(1.03±0.08 vs 0.39±0.07,t=10.420,P<0.001),伴有细胞增殖水平的降低(0.64±0.01 vs 0.42±0.01,t=30.160,P<0.001),CD11b和CD14阳性表达率升高[(2.18±0.53)%vs(22.10±0.87)%,t=33.530,P<0.001;(3.37±0.73)%vs(22.98±5.43)%,t=6.195,P=0.004]。拯救实验结果表明,miR-let-7c-5p mimics+c-myc vector组的c-myc蛋白表达水平高于miR-let-7c-5p mimics组(0.53±0.02 vs 0.84±0.05,t=9.250,P<0.

关 键 词：白血病细胞 诱导分化  单核/巨噬细胞  miR-let-7c-5p  C-MYC

分 类 号：R733.7]