文献类型：期刊文章

作　　者：董杰[1] 刘若寒[1] 李守军[1,2] 周沛[1,2]

DONG Jie;LIU Ruohan;LI Shoujun;ZHOU Pei(Guangdong Provincial Key Laboratory of Prevention and Control for Severe Clinical Animal Diseases,College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China;Guangdong Engineering Technology Research Center for Pet,College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)

机构地区：[1]华南农业大学兽医学院广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室,广东广州510642 [2]华南农业大学兽医学院广东省宠物工程技术研究中心,广东广州510642

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(2022A1515010733,2023A1515012171);广州市科技局基础与应用基础专题资助项目(SL2022A04J00674)。

年　　份：2023

卷　　号：43

期　　号：4

起止页码：699-705

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2023_2024、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：建立了犬圆环病毒(canine circovirus,CanineCV)EvaGreen实时荧光定量PCR检测方法。用PCR方法克隆CanineCVRep基因中的高保守区,扩增的目的片段大小为217bp,将其克隆至pMD18-T载体上,构建PCR检测阳性参考质粒,并用阳性参考质粒,进行各项反应条件优化。建立的标准曲线呈现出较高拟合性的线性回归,R2值为0.9995;该方法检测灵敏度为3.88×10^(1) copies/μL;在重复性试验中,组内和组间重复变异系数均小于2%,表明该方法具有良好的重复性;该方法对犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬流感病毒、犬副流感病毒、犬腺病毒2型、犬冠状病毒等犬常见病原的检测均无交叉反应;临床样本检测表明,所建立的EvaGreen实时荧光定量PCR对CanineCV的阳性检出率为2.82%(5/177),高于普通PCR检测的CanineCV阳性率1.13%(2/177)。本研究成功建立了一种用于快速检测CanineCV的EvaGreen qPCR方法,该方法安全且具有较好的特异性、敏感性和重复性,可作为CanineCV感染的病原学检测工具。

关 键 词：犬圆环病毒  EvaGreen  实时荧光定量PCR

分 类 号：S852.65]