文献类型：期刊文章

作　　者：季思琦[1,2] 赵亚楠[1,2] 周建霞[1,2] 陈宗海[1,2,3] 梁华敏[1,2]

JI Si-Qi;ZHAO Ya-Nan;ZHOU Jian-Xia;CHEN Zong-Hai;LIANG Hua-Min(Department of Physiology,Chinese-German Stem Cell Center,Hubei Key Laboratory of Drug Target Research and Pharmacodynamic Evaluation(Huazhong University of Science and Technology),School of Basic Medicine,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China;National Demonstration Center for Experimental Basic Medical Education,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430030,China;Department of Pathophysiology,Hubei University of Nationalities,Enshi 445000,China)

机构地区：[1]华中科技大学基础医学院生理学系,中德干细胞中心,湖北省药物靶点和药效学评价重点实验室,武汉430030 [2]华中科技大学基础医学国家级实验教学示范中心,武汉430030 [3]湖北民族学院病理生理学系,恩施445000

出　　处：《生理学报》

基　　金：supported by the Undergraduate Training Programs for Innovation and Entrepreneurship of Huazhong University of Science and Technology,China(No.HUST:16A177;201810478096)。

年　　份：2023

卷　　号：75

期　　号：1

起止页码：49-58

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2023_2024、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心脏微环境的重要组成部分。在不同模型中,IL-6通过促进心肌细胞再生帮助心脏修复。胚胎干细胞是心脏修复中心肌再生的良好来源。本研究旨在探讨IL-6对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)及其心肌分化的影响。IL-6处理mESCs两天,用CCK-8法检测mESCs增殖情况,用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测干性和胚层分化基因mRNA表达水平,用Western blot检测干细胞相关信号通路的磷酸化水平,用siRNA干扰STAT3磷酸化功能。通过检测搏动拟胚体(embryoid bodies,EBs)比例和qPCR检测心脏前体细胞标记物和心肌细胞离子通道mRNA表达水平来评估mESCs的分化能力。从胚胎干细胞分化第1天(EB0)开始使用IL-6中和抗体阻断内源性IL-6的作用,分别在EB7、EB10和EB15检测心肌细胞分化;在EB15用免疫组织化学染色法示踪心肌细胞,并用Western blot检测干细胞相关信号通路的磷酸化情况。在EB4、EB7、EB10和EB15时给予短期IL-6抗体处理,观察发育后期搏动EBs比例。结果显示,外源性IL-6促进mESCs增殖和多能性的维持,表现为上调癌基因c-fos、c-jun和干性标志物oct4、nanog mRNA表达水平,下调胚层分化标记物branchyury、FLK-1、pecam、ncam和sox17 mRNA表达水平,提高ERK1/2和STAT3磷酸化水平;针对JAK/STAT3的siRNA可部分减弱IL-6对细胞增殖和c-fos、c-jun mRNA表达水平的作用。在分化过程中,IL-6中和抗体的长期作用可减小搏动EBs比例,下调ISL1、GATA4、α-MHC、cTnT、kir2.1和cav1.2 mRNA水平,降低EBs和单个细胞的心肌αactinin荧光强度,下调STAT3磷酸化水平。此外,从EB4开始的短期(2 d)IL-6抗体处理显著降低发育后期搏动EBs的比例,而从EB10开始的短期IL-6抗体处理显著提高EB16搏动EBs的比例。以上结果提示,外源性IL-6促进mESCs增殖,有利于干细胞干性维持;内源性IL-6对mESCs心肌分化的影响呈发育依赖性。这些

关 键 词：胚胎干细胞 心肌分化 白细胞介素6 心肌再生

分 类 号：R329.2]