文献类型：期刊文章

作　　者：赵维宏[1] 韩文雄[2] 杨波[3] 孟维康[1] 柴海亮[1] 马懿敏[1] 张占胜[1] 王利峰[1] 王艳[1] 王明圆[1] 张姗[1] 丁玉林[1] 王金玲[1] 吉林台[1] 王凤龙[1] 赵丽[1] 刘永宏[1]

ZHAO WeiHong;HAN WenXiong;YANG Bo;MENG WeiKang;CHAI HaiLiang;MA YiMin;ZHANG ZhanSheng;WANG LiFeng;WANG Yan;WANG MingYuan;ZHANG Shan;DING YuLin;WANG JinLing;JIRINTAI Sulijid;WANG FengLong;ZHAO Li;LIU YongHong(College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Hohhot 010000;Inner Mongolia Saikexing Reproductive Biotechnology(Group)Co.,Ltd.,Hohhot,011517;Animal Disease Control Center of Ordos,Ordos 017000,Inner Mongolia)

机构地区：[1]内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010000 [2]内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司,呼和浩特011517 [3]鄂尔多斯市动物疫病预防控制中心,内蒙古鄂尔多斯017000

出　　处：《中国农业科学》

基　　金：国家自然科学基金(31860698);内蒙古农业大学高层次人才科研启动金项目(NDYB2019-3,NDYB2018-5)。

年　　份：2023

卷　　号：56

期　　号：6

起止页码：1204-1214

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2023_2024、EAPJ、GEOBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】副结核病被世界动物卫生组织(OIE)列入必须报告的《OIE疫病、感染及侵染名录》,我国将其列为二类动物疫病,引起多种反刍动物慢性、增生性肠炎,感染动物通过肠道间歇性排菌而成为养殖场的持续传染源,给养殖业带来了巨大经济损失。其病原体副结核分枝杆菌(MAP)属于胞内寄生的革兰氏阳性菌,为三类动物病原微生物,包括S型(羊型,细分为Ⅰ型、Ⅲ型和骆驼型)和C型(牛型、Ⅱ型,包括B型(野牛型))。有研究表明,各亚型MAP无宿主特异性,但具有地域性,内蒙古作为国内该病的首发地区,获得并准确鉴定内蒙古地区MAP菌株亚型及基因特征,对副结核病的预防控制意义重大。【方法】对内蒙古地区来源的28份MAP阳性的羊源病料进行MAP分离培养,菌落Ziehl-Neelsen染色,染色阳性菌扩繁,提取扩繁菌液基因组DNA,进行IS900基因、IS1311基因和DMC基因扩增、测序和序列分析,同时IS1311基因PCR产物进行Hinf I和Mse I双酶切鉴定。【结果】28份样品经过7—12周培养,共有9支培养基长出菌落,菌落半透明乳白色、表面光滑。挑取单菌落进行抗酸染色,在显微镜下观察到呈不规则(单个或分枝状)、红染的细短杆菌,符合分枝杆菌的形态学特征及抗酸染色特性。9株分离菌IS900、IS1311和DMC基因PCR扩增产物均与目的基因片段预期大小一致。确定了本研究9株分离株均为MAP菌株,分别命名为MAP-NM1至MAP-NM9。DMC基因扩增产物大小为310bp,符合Ⅱ型MAP特征;IS1311基因扩增产物经HinfⅠ和MseⅠ双酶切,本研究9株MAP均得到4条目的条带,与Ⅱ型MAP一致;IS1311基因测序结果与S型、C型、印度野牛型和美国野牛型MAP代表株对照分析显示,9株MAP IS1311基因片段的64、65、68、223、236、422、527、628位碱基位点符合C型和B型MAP特征;IS900基因测序结果序列分析显示,9株MAP IS900基因片段第169位及第216位碱基分别为C(胞嘧啶)和A

关 键 词：副结核分枝杆菌 分离培养  亚型鉴定 羊  内蒙古  

分 类 号：S852.61]