文献类型：期刊文章

作　　者：刘翠华[1] 邓林林[1] 赵方新[1] 红梅[1] 武建强[1] 温琪[2] 赵旭[2] 郝咪咪[2] 石韵隽[2] 张烜[1]

LIU Cuihua;DENG Linlin;ZHAO Fangxin;HONG Mei;WU Jianqiang;WEN Qi;ZHAO Xu;HAO Mimi;SHI Yunjun;ZHANG Xuan(Laboratory of Microbiology and Immunology,College of Basic Medicine,Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010059,China;First Clinical Medical College,Inner Mongolia Medical University)

机构地区：[1]内蒙古医科大学基础医学院微生物与免疫学研究室,呼和浩特010059 [2]内蒙古医科大学第一临床医学院

出　　处：《山西医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81660482);内蒙古自治区自然科学基金项目(2022MS08009);内蒙古医科大学大学生科技创新“英才培育”项目(YCPY2021040);内蒙古自治区卫生健康科技计划项目(202202128);大学生创新创业训练计划项目(自治区级)(202210132020)。

年　　份：2023

卷　　号：54

期　　号：1

起止页码：1-8

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探讨miR-4660对肝癌细胞SK-HEP-1侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法利用癌症数据在线分析网站UALCAN分析肿瘤基因组图谱数据库TCGA中肝细胞癌组织中半乳糖凝集素3结合蛋白(LGALS3BP)基因表达,miRNA靶基因预测网站Targetscan在线预测miR-4660与LGALS3BP基因3′非翻译区(3′UTR)的结合关系。利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-4660与LGALS3BP基因之间的调控关系。分别将miR-4660模拟物(mimics)、抑制剂(inhibitor)及其阴性对照(miR-NC)转染至人SK-HEP-1细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot检测LGALS3BP基因及PI3K/Akt信号通路蛋白p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt的表达水平。细胞划痕及Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力。结果UALCAN分析显示,相对于正常组织,在肝细胞癌组织中LGALS3BP显著高表达(P<0.05)。Targetscan预测到,miR-4660在LGALS3BP 3′UTR区有两个结合位点。双荧光报告基因实验显示,miR-4660 mimic组野生型重组载体pGL3-LGAL-W-3′UTR、位点1或位点2单独突变的重组载体(pGL3-LGAL-M1-3′UTR和pGL3-LGAL-M2-3′UTR)的相对荧光素酶活性均低于miR-NC组(P<0.05)。qRT-PCR及Western blot结果显示,miR-4660 mimic组LGALS3BP基因在mRNA及蛋白水平的表达,p-PI3K、p-Akt蛋白的表达均低于未转染组及miR-NC组(P<0.05),miR-4660 inhibitor组上述指标均高于miR-NC组(P<0.05)。细胞划痕及Transwell实验发现,过表达miR-4660后SK-HEP-1细胞的迁移及侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论miR-4660通过下调靶基因LGALS3BP的表达进而降低PI3K/Akt信号通路活性,抑制肝癌SK-HEP-1细胞的迁移及侵袭。

关 键 词：肝癌 miR-4660  LGALS3BP基因  迁移 侵袭  

分 类 号：R735.7]