文献类型：期刊文章

作　　者：李钰昌[1] 郑亮[1,2] 张华[1,2,3] 吴志军[1,2,3] 肖莉杰[1,2,3] 曹宏伟[1,2,3]

Li Yuchang;Zheng Liang;Zhang Hua;Wu Zhijun;Xiao Lijie;Cao Hongwei(College of Life Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Daqing163319;College of Animal Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University;Biotechnology Center,Heilongjiang Bayi Agricultural University)

机构地区：[1]黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆163319 [2]黑龙江八一农垦大学动物科技学院 [3]黑龙江八一农垦大学生物技术中心

出　　处：《黑龙江八一农垦大学学报》

基　　金：黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2019C046)。

年　　份：2023

卷　　号：35

期　　号：1

起止页码：78-83

语　　种：中文

收录情况：JST、普通刊

摘　　要：猪圆环病毒2型是一种常见的猪感染性病毒,Cap蛋白为猪圆环病毒2型的核衣壳蛋白,也是该病毒最主要的结构蛋白,是目前猪圆环病毒2型基因工程疫苗研制的关键蛋白。研究构建了Cap蛋白原核表达质粒pET28a-His-Cap,转化Transetta(DE3)表达菌株,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE及蛋白免疫印迹试验验证,重组蛋白主要以可溶性形式表达,少数为包涵体蛋白。以Ni-NTA树脂进行蛋白纯化,纯化后蛋白浓度为629μg·mL^(-1),采用透析袋浓缩将重组蛋白浓缩,浓缩后蛋白终浓度为1.8 mg·mL^(-1)。将重组蛋白与弗氏佐剂等体积混合,充分乳化后制备抗原,免疫兔子采集全血,分离血清。经蛋白免疫印迹试验,该多抗与重组蛋白存在免疫反应性,ELISA检测抗体效价可达1∶32000,IFA试验证明该多抗能够特异性识别猪圆环病毒2型。Cap蛋白多克隆抗体的成功制备,为后续猪圆环病毒2型基因工程疫苗制备过程中验证Cap体外蛋白表达提供了材料。

关 键 词：PCV2 Cap蛋白  原核表达 多克隆抗体

分 类 号：S828] S852.651]